目录号 | MM1706-60KIT | 售价 | 655.00元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
规格 | 60T | 运输温度 | 冰袋运输 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
其他名称 | 小鼠免疫组化试剂盒;免疫组化试剂盒(抗小鼠); | 保存温度 | 2-8℃保存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CAS号 | N/A | 有效期 | 1年 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
应用 | 免疫组化检测 | 订购数量 |
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产品简介: Mouse IHC Kit 免疫组化试剂盒(小鼠一抗来源)
产品特点: 类似于Invitrogen Histostain-Plus IHC Kit,使用 LAB-SA (Labeled Streptavidin-Biotin)+DAB显色系统,适用于广谱的免疫组化检测。
产品信息
产品描述 免疫组化试剂盒(小鼠一抗来源)(Mouse IHC Kit)是一款特异性检测一抗源为小鼠单克隆或多克隆的免疫组化试剂盒,检测原理基于高特异性和灵敏度的生物素-链霉亲和素信号放大系统,以及辣根过氧化物酶催化底物DAB显色,从而识别目标抗原的过程。本品适用于石蜡切片、冰冻切片、细胞涂片以及血液标本。
产品组成
保存与运输方法 保存:2-8℃保存,1年有效,不可冻存。 运输:冰袋运输。
注意事项 1. 建议检测目的标本的同时,设置阴性对照和阳性对照。 2. DAB具潜在致癌性,操作时注意防护,避免直接接触皮肤。 3. DAB工作液需现配现用,避光放置,需在30min内完成染色。 4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法 一、用户自行准备试剂 1.1 二甲苯、乙醇、无水甲醇 1.2 蒸馏水或去离子水 1.3 30% H2O2 1.4 1×PBS, pH 7.2-7.4 1.5 一抗(宿主为小鼠) 1.6 苏木素染色液 1.7 中性树胶封片
二、染色步骤(以石蜡切片为例) 1. 标本制备 石蜡切片用二甲苯常规脱蜡、入水、抗原修复(按照一抗说明书推荐方法或实验室标准流程进行操作)。 染色前用1×PBS浸泡组织或细胞涂片10min。从此步开始,严禁标本或组织切片干燥
2. 染色流程 2.1 将石蜡切片放入3% H2O2-甲醇溶液中浸泡10min,目的消除内源性过氧化氢酶活性。 2.2 用PBS清洗3次,2 min/次。 2.3 加一滴(50μl)10%山羊血清封闭液于组织上(需完全覆盖组织),室温孵育10min。 2.4 倒掉或吸尽液体(不可冲洗)。 2.5 每张切片加100μl或适量宿主为小鼠的一抗(需完全覆盖组织),湿盒内孵育30-60min。 2.6 用PBS清洗3次,2 min/次。 2.7 每张切片加一滴(50μl)生物素化抗小鼠二抗(需完全覆盖组织),孵育10min。 2.8 用PBS清洗3次,2 min/次。 2.9 每张切片加一滴(50μl)HRP标记链霉亲和素(需完全覆盖组织),孵育10min。 2.10 用PBS清洗3次,2 min/次。 2.11 制备DAB显色工作液,需要现配现用,请根据具体需染色的切片数来配制。 此处为1张切片用量的配制方法:a)取2.5µl 20×DAB底物缓冲液加入到50µl蒸馏水或去离子水,混匀;b)分别取2.5µl 20×DAB底物浓缩液,2.5µl 20×过氧化氢浓缩液到a)中混合溶液,充分混匀,避光保存。 2.12 每张切片加一滴(50μl)新鲜配制的DAB显色工作液,室温显色2-5min(可在显微镜下控制显色程度)。 2.13 自来水充分冲洗; 2.14 苏木素染色液复染。盐酸酒精分化。 2.15 脱水、透明、封片、镜检。
3. 染色结果 阳性染色:在抗原定位处被染成棕黄或棕褐色。
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