收藏本站    您好,欢迎光临上海懋康生物科技有限公司!
登录  |   注册
当前位置: 首页> 产品中心> 细胞生物学 > 细胞增殖与凋亡 > AO/EB Double Staining Kit AO/EB双染试剂盒
AO/EB Double Staining Kit AO/EB双染试剂盒
目录号 MX3249-100T 售价 220.00元
规格 100T 运输温度 冰袋
其他名称 AO/EB细胞双染试剂盒;吖啶橙/溴化乙锭双染试剂盒; 保存温度 4~25℃保存
CAS号 N/A 有效期 1年
应用 细胞凋亡、坏死检测 订购数量
产品简介:

AO/EB Double Staining Kit AO/EB双染试剂盒


关键词:

吖啶橙(Acridine Orange,AO);溴化乙锭(Ethidium Bromide, EB);Apoptotic cell凋亡细胞;Necrotic cells坏死细胞;Annexin V/PI细胞凋亡双染;


产品信息

产品名称

产品编号           

规格            

价格(元)       

AO/EB Double Staining Kit AO/EB双染试剂盒   

MX3249-100T

100T

220


产品描述

吖啶橙(Acridine Orange,AO)是一种异染的核酸结合染料,具细胞膜渗透性,通过插入或静电吸引的方式与DNA或RNA结合。当与双链DNA(dsDNA)结合发射绿色荧光(Ex/Em=502/525nm),与单链DNA(ssDNA)或RNA结合发射红色荧光(Ex/Em=460/650nm),少量结合呈橙红色荧光。溴化乙锭(Ethidium Bromide, EB)是一种多环芳烃荧光小分子和核酸插入剂,嵌合到双链DNA或RNA的碱基对内,无碱基特异性,呈红色荧光((Ex/Em=518/605nm)。EB不具细胞膜渗透性。


吖啶橙(AO)和溴化乙锭(EB)常常联合使用来观察细胞核变化和凋亡小体形成,这些都是凋亡的特征。两者结合能区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞。工作原理在于吖啶橙能同时染活细胞和死细胞,EB只能对丧失膜完整性的细胞进行染色。活细胞呈均匀的绿色。早期凋亡细胞呈绿色,并且在细胞核能看到亮绿色的点,由于染色体浓缩和核断裂。晚期凋亡细胞也会被EB着色,从而染成橙红色,但,与坏死细胞相比,晚期凋亡细胞会有浓缩和常常断裂的核。坏死细胞也被染成橙红色,但会有和活细胞相似的核形态,没有浓缩的染色体。


我司(懋康生物)提供的AO/EB双染试剂盒(AO/EB Double Staining Kit)提供完整的试剂,操作简单,根据说明书操作能做100个反应。


产品包装

编号

组分名称

保存方法           

货号(规格)           

MX3249-100T

MX3249-A       

AO Stain Solution 吖啶橙染液

4℃避光

200μl

MX3249-B

EB Stain Solution 溴化乙锭染液        

4-25℃避光

200μl

MX3249-C

Dilution Buffer 稀释缓冲液

4℃避光

50ml


保存与运输方法

保存:4-25℃避光保存,详见瓶上标签。1年有效。

运输:冰袋运输。


注意事项

1)AO与EB都有一定毒性,请小心操作。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


使用方法

1.染色工作液的制备

于正式实验前,取吖啶橙染液(试剂A)、溴化乙锭染液(试剂B)、稀释缓冲液(试剂C),按照A:B:C=1:1:8的比例稀释成所需的AO/EB染色工作液。

 

2.细胞准备

贴壁细胞:按照常规方法消化。于1000rpm离心5min,收集细胞沉淀,用PBS清洗一次。

悬浮细胞:于1000rpm离心5min,收集细胞沉淀,用PBS清洗一次。

之后用稀释缓冲液(试剂C)重悬细胞,细胞计数,调整细胞密度为0.5-5×106个/ml。


3.染色

每25μl细胞悬液中,加入2μl新鲜制备的AO/EB染色工作液,轻轻混合均匀。室温孵育5~10min。


4.观察

取干净载玻片,滴加5~10μl染色的细胞悬液,盖上盖玻片。使用荧光显微镜的荧光素滤片和60倍放大的物镜来观察和计数。该测定至少重复三次,每次观察的总细胞至少100个。

【注意】:根据细胞类型选择理想的物镜放大倍数(更高或更低),前提是必须看清核形态。


应用示例(来自文献):

文献:Dual AO/EB Staining to Detect Apoptosis in Osteosarcoma Cells Compared with Flow Cytometry.


染色方法:Dual fluorescent staining solution (1 μl) containing 100 μg/ml AO and 100 μg/ml EB (AO/EB) was added to each suspension and then covered with a coverslip. The morphology of apoptotic cells was examined and 500 cells were counted within 20 min using a fluorescent microscope (OLYMPUS). Dual acridine orange/ethidium bromide (AO/EB) staining method was repeated 3 times at least.


Fig. (A)阴性对照细胞(正常细胞):环形细胞核均匀分布在细胞中央。(B)实验组(早期凋亡细胞):吖啶橙(AO)染色后的细胞核呈黄绿色荧光,以月牙形或颗粒的形态聚集位于细胞的一边。(C)实验组(晚期凋亡细胞):经EB染色后的细胞核呈橙红荧光,集中聚集且偏重定位。(D)坏死细胞:坏死细胞体积增加,显示平整的橙红色荧光和不清晰的轮廓。细胞正要溶解或接近崩溃。


相关产品

货号

名称

规格                

MF0756-1G                

Ethidium Bromide (EB) 溴化乙锭

1g

MF0756-5ML

EB (10 mg/ml in Water) EB水溶液(10 mg/ml)

5ml

MX4217-250MG

Acridine Orange Hydrochloride吖 啶橙盐酸盐

250mg

MX4230-5G

Acridine Orange hemi(zinc chloride) salt 吖啶橙半氯化锌盐        

5g

MX3249-100T

AO/EB Double Staining Kit AO/EB双染试剂盒

100T

MX3250-100T

Hoechst 33258/PI Double Stain Kit 细胞凋亡双染试剂盒

100T

MX3201-100T

Hoechst 33342/PI Double Stain Kit 细胞凋亡双染试剂盒

100T

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

 

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本,以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。

电话:021-54736159    传真:021-54736159    手机:18121428569
邮箱: sales@maokangbio.com
地址:上海市徐汇区龙吴路2888弄23号902室    
版权所有:上海懋康生物科技有限公司
沪ICP备16016464号-1