目录号 | MX4036-5MG | 售价 | 1588.00元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
规格 | 5mg | 运输温度 | 冰袋运输 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
其他名称 | 1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'- Tetramethylindocarbocyanine-5,5'-Disulfonic Acid | 保存温度 | -20ºC干燥避光保存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CAS号 | N/A | 有效期 | 至少一年 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
应用 | 细胞膜橙红色探针 | 订购数量 |
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产品简介: DiIC18(3)-DS 细胞膜橙色荧光探针
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订购信息:
【关联提示】: DiIC18(3)-DS是DiI(DiIC18(3), MX4002)的磺酸化衍生物,具有更好的水溶性,且在固定和透化处理后能维持良好的染色状态。
产品描述: DiIC18(3)-DS是橙色荧光和亲脂性碳菁类染料-DiI(DiIC18(3))的类似物,英文全名:1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'- Tetramethylindocarbocyanine-5,5'-Disulfonic Acid,包含磺酸基团以改进探针的水溶性。在水中呈弱荧光,插入膜内则呈强荧光且相当稳定。在脂质环境内具极其高的摩尔吸光系数和短的激发态寿命(~1ns)。一旦进入细胞后,在细胞内质膜中逐步扩散,于最佳浓度条件下可将整个细胞均匀染色。
基本特性:
保存与运输方法 保存:-20ºC干燥避光保存,有效期至少一年。 运输:室温运输。
注意事项 1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法 【注意】以下使用方法仅用作参考,可根据具体的实验条件做出调整。 1. 染色液制备 1)储存液制备:用DMSO配置浓度1~5 mM的储存液。例如,取5mgDiIC18(3)-DS(Mw:993.53g/mol)溶于1ml无水DMSO中,充分溶解,即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液根据单次用量分装储存在-20℃,避免反复冻融。 2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,调整到1~5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始,以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。
2.悬浮细胞染色 1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。 2)37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化以保证得到均一化的标记结果。 3)孵育结束,按1000~1500 rpm离心5min。 4)去除上清液,之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。 5)再重复3),4)步骤两次。
3.贴壁细胞染色 1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。 2)从培养基中移走盖玻片,滤掉过量培养液,将盖玻片放在潮湿的小室内。 3)在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。 4)37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化以保证得到均一化的标记结果。 5)吸掉染色工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸走培养基。
4.显微镜检测 1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见下表:
2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定: a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004; b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007; c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005;
5.流式细胞仪检测 经DiO,DiI,DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1,FL2,FL3或FL4通道检测。
注意事项 1)经碳菁类染料(比如DiR)染色后的细胞能用多聚甲醛(PFA)固定,但不能用甲醇或其他溶剂的固定剂。染色能承受0.1% Triton X-100或0.1%毛地黄皂苷的透化处理,但会明显增强胞内染色。 2)经碳菁类染料(比如DiR)染色后的细胞不建议使用封片剂,因封片剂内的甘油或有机溶剂会溶解染料,引起增加的胞内染色和随时间增加的高背景。建议直接在PBS或其他生理缓冲液内成像。使用PBS直接盖上盖玻片,然后四周用指甲油密封。 3)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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——Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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