Acetosyringone乙酰丁香酮

（农杆菌介导的转化增强剂）

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Acetosyringone乙酰丁香酮；Natural phenolic compounds天然酚类化合物；Vir（virulence）基因；Agrobacterium-Mediated Transformation农杆菌介导的转化研究；GUS瞬时表达；X-Gluc；CAS：2478-38-8

产品信息

产品描述

乙酰丁香酮（Acetosyringone，CAS：2478-38-8），也称为4'-羟基-3',5'-二甲氧基苯乙酮（4'-Hydroxy-3',5'- dimethoxyacetophenone），一种由受伤的植物细胞分泌的天然合成酚类化合物，最为熟知的生理功能是参与植物-病原菌识别过程。乙酰丁香酮可提高植物转化效率，作用机制在于其能诱导农杆菌Vir基因的转录和高效表达，刺激T-DNA转化并且整合进入植物基因组内。还可用于合成4-甲氧基查尔酮及其类似物，体外用作抗肿瘤药。

我司提供两种形式的乙酰丁香酮，达植物组织培养级别：一种以冻干粉形式提供，纯度≥98%；一种以溶于DMSO的无菌溶液形式提供，浓度为100mM。本品用于农杆菌介导的遗传转化研究中，常用工作浓度为50-200μM。

产品特性

1）CAS NO：2478-38-8
2）同义名：4'-Hydroxy-3',5'- dimethoxyacetophenone; 3′,5′-Dimethoxy-4′- hydroxyacetophenone; 4'-羟基-3',5'-二甲氧基苯乙酮；3',5'-二甲氧基-4'-羟基苯乙酮；
3）分子式：C10H12O4
4）分子量：196.20 g/mol
5）纯度：≥98%
6）熔点：124-127° C (lit.)
7）溶解性：微溶于水，溶于DMSO，乙醇和热甲醇
8）化学结构式：

保存与运输方法

保存：冻干粉置于2-8℃干燥保存，2年稳定；溶液置于-20°C避光保存，一年稳定。

运输：冻干粉室温运输；溶液冰袋运输；

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存液配制【针对冻干粉】

1. 称取392.4mg乙酰丁香酮（Mw：196.2g/mol）溶于12ml 95%乙醇，之后加入8ml无菌水，混匀后，

即得到100mM储存液。滤膜过滤除菌后，-20℃分装冻存。【注意：本品对热敏感，不可高压灭菌。】

1. 称取392.4mg乙酰丁香酮溶于20mlDMSO，充分混匀后，即得到100mM储存液，-20℃分装冻存。

      【注意】：请勿对乙酰丁香酮做高压灭菌处理。 

使用案例

【注意】：以下是农杆菌介导的真菌转化（Agobacterium-mediated transformation ofC. graminicola）操作步骤，仅作参考。具体步骤请根据实际情况调整。

1.1乙酰丁香酮储存液制备

称取392.4mg乙酰丁香酮（Mw：196.2g/mol）溶于12ml 95%乙醇，之后加入8ml无菌水，混匀后，即得到100mM储存液。滤膜过滤除菌后，-20℃分装冻存。

1.2转化步骤

S1：将已经转化有质粒的农杆菌（Agro）接种到添加有50mg/ml卡那霉素（按照500μl/500ml培养基）的LB固体培养基，29° C倒置培养48h。使用质粒-农杆菌为：pRAN-AgL-1.

S2：使用无菌接种环，挑取快速生长的农杆菌克隆到5ml MMB肉汤（minimal media broth），添加有5 µl硫胺（1g/ml储存液）和5 µl卡那霉素（50mg/ml储存液）。29° C摇床上震动培养48h，230-250rpm。

S3：吸取150-200µl上述培养物到5ml诱导培养液（IM，Induction Media），添加有10 µl乙酰丁香酮（AS，100mM储存液）和5 µl硫胺（1g/ml储存液）。29° C于230-250rpm摇床上震动培养约6h，直至OD600至少达到0.25。

S4：吸取300µl上述Agro-IM培养物和100µl真菌孢子（浓度约106孢子/ml）到1.5ml离心管内共培养。此时可将管子在工作台上放置一会，此时需要将小片NC滤片（Millipore 0.45µm HA）铺到固体的IM培养基上，添加有200 µl乙酰丁香酮（AS，100mM储存液）和100 µl硫胺（1g/ml储存液），这个过程约20-25mins。

S5：吸取200-400ul共培养Agro/孢子到NC片膜上，并用无菌玻璃棒或无菌塑料片涂布均匀。将平板放到工作台或者常规真菌转化用的生长区域进行孵育2-5天。对照组只涂布孢子悬液到NC膜片上。

S6：使用无菌镊子转化12个上述培养的NC膜片到PDA培养基上，添加有噻孢霉素（终浓度：200µg/ml），羧苄青霉素（终浓度：250µg/ml），潮霉素B（终浓度：250µg/ml）。室温或者真菌生长需要的温度进行培养。

S7：最后将转化好的克隆接种到含有潮霉素B（终浓度：250µg/ml）的PDA培养基。

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