DiBAC4(3)    膜电位荧光探针

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DiBAC4(3)；DiSBAC2(3)；Oxonol V；Membrane potential probe细胞膜电位探针 Slow-response probes慢反应探针；CAS：70363-83-6；

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产品描述

慢反应探针（Slow-response probes），包括阳离子羰花青、罗丹明和阴离子氧鎓醇（Oxonols），都适合用来检测不可兴奋细胞因呼吸活性、离子通道渗透，药物结合和其他因素引起的平均膜电位变化。

DiBAC4(3) (Bis-(1,3-Dibutylbarbituric Acid)Trimethine Oxonol)，一种慢反应的膜电位敏感探针，随着膜电位变化在细胞膜内进行重新分配。当染料由于膜的去极化进入细胞膜，荧光增强且往红色光谱迁移。DiBAC4(3)对膜电位变化的荧光反应速率通常比苯乙烯染料（比如Di-4-ANEPPS）慢，但荧光信号变化明显更大（通常~1% fluorescence change/mV）。DiBAC染料由于总负电荷被线粒体所排斥，使其在质膜电位测定上优于羰花青染料。DiBAC4(3)用在流式实验中监测防御素的抗菌活性。 

产品特性

1）CAS NO：70363-83-6
2）化学名：2,4,6(1H,3H,5H)-Pyrimidinetrione, 1,3-dibutyl-5-(3-(1,3-dibutyl-1,2,3,4-tetrahydro-6-hydroxy-2,4- dioxo-5-pyrimidinyl)-2-propenylidene)
3）分子式：C27H40N4O6
4）分子量：516.64 g/mol
5）外观：橙色/红色固体
6）Ex/Em：493/516 nm
7）溶解性：溶于DMSO、DMF
8） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃干燥避光保存，有效期至少一年。

运输：冰袋运输。

应用示例：

文献来源：Jepras RI et al. Rapid assessment of antibiotic effects on Escherichia coli by bis-(1,3-dibutylbarbituric acid) trimethine oxonol and flow cytometry. Antimicrob Agents Chemother. 1997 Sep;41(9):2001-5.

实验方法（细胞染色MK）： 用乙醇溶解DiBAC4(3)配制1mg/ml的母液，置于-20℃保存。从培养瓶内吸取1ml培养物（E. coli ATCC 35218），用含10μl/ml DiBAC4(3)的无菌PBS稀释到106个细菌/ml。对于少于106个细菌/ml的悬液，直接加DiBAC4(3)到1ml培养液内。室温孵育2min，之后进行流式分析。

染色结果（流式分析MK）：

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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——Written/Editedby V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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引用文献：

[1] Chen P, Liu Y, Li C, Hua S, Sun C, Huang L. Antibacterial mechanism of vanillin against Escherichia coli O157: H7. Heliyon. 2023 Aug 19;9(9):e19280. doi: 10.1016/j.heliyon.2023.e19280. PMID: 37662745; PMCID: PMC10474422.

E. coli O157:H7 cells were suspended in PBS to a concentration of 1.0 × 10⁶ CFU/mL in the logarithmic growth phase. Different concentrations of vanillin solution (0, 1/2 MIC, 1 MIC, and 2 MIC) were added to the bacterial suspension, followed by incubation at 37 °C for 4 h. Next, a 200 μL of cell suspension was mixed with 1 μM of fluorescent probe DiBAC4(3) (Shanghai Maokang Biotechnology Co., Ltd., China) in a black 96-well microtiter plate. After incubation at 37 °C for 15 min in the dark, a fully functional enzyme marker (Synergy H1, Biotek, Vermont, USA) was used with excitation and emission wavelengths set at 492 nm and 515 nm, respectively, to measure the fluorescence intensity.