产品简介:
Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell
大肠杆菌化学感受态细胞
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搜索关键词：
EPI400；EC100；CopyCutter Induction Solution；toxic or unstable DNA毒性或不稳定DNA；Epicentre；
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货号
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产品名称
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规格
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价格（元）
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MF2486-1000UL
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Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell
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10×100μl
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396
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MF2486-5000UL
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Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell
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50×100μl
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1696
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【好消息】：见我司的感受态细胞促销活动。买感受态细胞得京东卡，发表使用评论，赢红包，双重惊喜，行动起来啦。
产品组分：
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组分编号
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组分名称
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货号（规格）
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MF2486-1000UL
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MF2486-5000UL
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MF2486-A
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Rosetta 2(DE3) Competent Cell
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10×100μl
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50×100μl
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MF2486-B
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Control Vector puC19, 10pg/μl
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10μl
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10μl
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菌株描述
Rosetta 2宿主菌是BL21衍生菌，特别设计用于提高含大肠杆菌稀有密码子的真核蛋白的表达水平，这些菌株补充7种大肠杆菌缺乏的稀有密码子（AGA, AGG, AUA, CUA, GGA, CCC, CGG）对应的tRNA，位于兼容的氯霉素抗性质粒上。tRNA基因由天然启动子所启动。
DE3命名表明该菌株染色体上整合λ噬菌体DE3溶原体（携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因）。这种菌株适用于目的基因克隆在pET载体上的蛋白生产，由IPTG诱导表达。
Rosetta 2(DE3)菌株基因型：F-ompThsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3) pRARE2 (CamR)
产品描述
本品是大肠杆菌Rosetta 2(DE3)菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
保存与运输条件
保存：-80℃保存，6个月有效。
运输：干冰运输。
注意事项
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感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。最好在冰上融化感受态细胞。
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进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。
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为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。
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产品包装内含载体pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。
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Rosetta 2(DE3)菌株携带pRARE2质粒，除复苏培养基无抗生素外，其余培养基（液）都应含氯霉素（34μg/ml），以防质粒丢失。
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诱导时，IPTG浓度范围可选：0.1~10mM。
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为了得到足量的蛋白，需就最佳诱导时间、温度、IPTG浓度进行优化。
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为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】
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将感受态细胞从-80℃取出，迅速插入冰中，5min后待菌块融化后，加入目的DNA，用手轻弹管底轻轻混匀（避免用移液枪吹打），冰浴静置25min。
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42℃热击45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。
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向每个离心管中加入700 μl无菌的LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
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低速离心收菌（比如5000rpm，1min），留取100μl左右上清，用枪轻轻吹打重悬菌块，加到含相应抗生素的LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃过夜培养。
【注意】：
a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，可取200-300 μl转化产物涂布平板。若预计的克隆较少，可通过离心（4,000 rpm，2min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。
b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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货号
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名称
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规格
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MF2331-1000UL
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Chloramphenicol, USP Grade氯霉素
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10g
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MS0019-10G
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Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素
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10g
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MF2002-1G
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IPTG异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
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1g
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
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