产品简介:
JM109(DE3) Chemically Competent Cell
大肠杆菌化学感受态细胞
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货号
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产品名称
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规格
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价格(元)
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MF2487-1000UL
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JM109(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞
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10×100μl
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396
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MF2487-5000UL
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JM109(DE3) Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞
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50×100μl
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1696
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【好消息】:见我司的感受态细胞促销活动。买感受态细胞得京东卡,发表使用评论,赢红包,双重惊喜,行动起来啦。
产品组分:
组分编号
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组分名
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货号(规格)
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MF2487-1000UL
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MF2487-5000UL
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MF2487-A
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JM109(DE3) Chemically Competent Cell
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10×100μl
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50×100μl
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MF2487-B
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Control Vector puC19,10pg/μl
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10μl
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10μl
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菌株描述
JM109(DE3)菌株,来源于JM109,含有T7 RNA聚合酶表达基因,整合在其染色体上,故称为JM109(DE3)。如果克隆至载体上的基因包含核糖体结合位点,JM109(DE3)则能对位于T7启动子下游的基因进行高水平的表达。JM109(DE3)能同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,适用于pET,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。JM109(DE3)菌株不可用于蓝白斑筛选。
JM109(DE3)菌株基因型:endA1, recA1, gyrA96, thi, hsdR17 (rk–, mk+), relA1, supE44, λ–, Δ(lac-proAB), [F´, traD36, proAB, lacIqZΔM15], lDE3
产品描述
本品是大肠杆菌JM109(DE3)菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率高于108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
保存与运输条件:
保存:-80℃保存,6个月有效。
运输:干冰运输。
注意事项
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感受态细胞必须用干冰运输,感受态细胞应在-80℃保存。
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感受态细胞最好在冰上融化,不可在冰上放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
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进行转化操作时,需在相应温度及无菌条件下进行。
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为防止转化实验不成功,可保留部分连接反应液以重新转化,将损失降到最低。
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产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl),供对照实验用。
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转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
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诱导时,IPTG浓度范围可选:0.1~2mM。
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为了得到足量的蛋白,需就最佳诱导时间、温度、IPTG浓度进行优化。
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为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】
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从-80℃冰箱取出取感受态细胞,迅速置于冰浴中,5min后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物),用手轻弹管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰浴静置25min。
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42℃水浴热激45s,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。
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向每个离心管中加700 μl无菌的LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃ 摇床,200 rpm振荡培养60min,目的使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
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低速离心收菌(比如5000rpm,1min),留取100μl左右上清,用枪轻轻吹打重悬菌块,之后加到含所选质粒筛选抗生素的LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于室温(或37℃)直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养过夜。
【注意】:
a)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可不用离心,直接取少量转化产物涂布平板;反之,若转化的DNA总量较少,则通过离心(5000 rpm,1min)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。
b)新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
c)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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货号
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名称
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规格
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MF2331-1000UL
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MF2002-1G
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1g
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本,以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
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