Hoechst 33342 细胞核探针

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Hoechst 33342 活细胞细胞核探针；Hoechst 33258；DAPI；PI 碘化丙啶；7-AAD；CAS：23491-52-3；

产品信息

温馨提示：见我司整理的细胞核（Cell Nuclear）荧光探针产品专题。

产品描述

Hoechst 33342，也称为Bisbenzimide H 33342（双苯酰亚胺H 33342），是一种A:T特异性的DNA小沟配基，具有细胞膜渗透性，广泛用于细胞核DNA检测的荧光染料。与DNA结合后产生非常强烈的蓝色荧光，最大激发波长在350nm左右，最大发射波长在461nm左右。与其它Hoechst染料不同，Hoechst 33342由于多一个乙基，具有更强的亲脂性。研究发现可替代几种著名的DNA嵌入剂。

Hoechst 33342可通过流式细胞分选（FACS）进行基于DNA内容物的活细胞分选，可用来监测活细胞的染色质分布，用来检测BrdU插入细胞情况，通过荧光显微镜进行固定细胞观察，和研究凋亡早期和细胞周期分布情况。除了在荧光方面的功能，Hoechst 33342在细胞类型区分方面呈现多样化效应。可用来诱导细胞分化，可逆结合弗兰德红白血病细胞，抑制Topo I（拓扑异构酶I）活性，诱导HL-60细胞的凋亡，以及调控连接肌质网细胞的Ca2+外流并影响细胞分化。

本品以粉末形式提供，溶于水，溶解度可达20mg/ml。用于细胞核染色，推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。

产品特性

1）CAS NO：23491-52-3

2）英文同义名：2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole trihydrochloride; bisBenzimide H 33342 trihydrochloride; HOE 33342; Hoechst 33342 bisBenzimide;

3）中文同义名：2'-(4-乙基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1H-苯并咪唑三盐酸盐；双苯酰亚胺H 33342三盐酸盐；Hoechst 33342双苯酰亚胺；

4）分子式：C27H28N6O · 3HCl · xH2O

5）分子量：561.93 (anhydrous basis)

6） 纯度：≥95%

7）外观：黄绿色粉末

8）溶解性：溶于水（20 mg/ml）

9）Ex/Em：346/460 nm；350/461 nm（Hoechst 33342-DNA）；

10）化学结构：

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，3年有效。

运输：冰袋运输。

储存液配制

用双蒸水溶解，溶解度高达20mg/ml，根据实际情况配制所需浓度的储存液如5mg/ml。储存液2-8ºC避光保存，至少1个月有效。【注意】：本品用磷酸盐缓冲液溶解会出现沉淀。

使用方法

1、工作液配制

用双蒸水或PBS稀释母液，配制成所需要的工作浓度（0.5-10μg/ml）。

2、固定的细胞或组织染色

对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。Hoechst 33342染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行Hoechst 33342染色。

2.1 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33342染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5min。

2.2 吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5min。

2.3 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=350/461nm。

3、活的细胞或组织染色

3.1 细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。对于六孔板，一个孔通常需加入1ml染色液；对于96孔板，一个孔通常需加入100μl染色液。

3.2 在37℃培养细胞10～20min。

3.3 用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

3.4 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=350/461nm。

注意事项

1）Hoechst 33342对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2）荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3）为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液（Fluoromount-GTM抗荧光淬灭封片剂（水溶性），货号：MM1401-5ML）。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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