Trypsin, TPCK Treated,Sequencing Grade

胰蛋白酶（TPCK处理）（测序级）

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TPCK-treated Trypsin 胰酶；Collagenase NB 4 胶原酶NB4；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II 中性蛋白酶；CAS：9002-07-7；

产品信息

产品描述

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶，由223个氨基酸残基组成的单链多肽，底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端，当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外，当切割位点任一边紧邻酸性残基，胰酶水解速率也会减缓。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以无活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通过切割其末端六肽而得到活化，产生天然单链形式的β-胰酶（β-Trypsin），随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin（由二硫键共价连接的二条肽链组成）。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制，有1）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；2）银离子；3）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是来源于猪胰腺的胰蛋白酶，经N-(对甲苯磺酰基)-L-苯丙氨酰甲基氯酮（TPCK）预处理以抑制任何残留的糜蛋白酶活性，具更高的胰蛋白酶活性。本品专一性切割蛋白分子中的赖氨酸和精氨酸位点，是蛋白质肽段分析重要的工具酶之一。本品以冻干粉形式提供，比活力≥10,000 BAEE units/mg protein。

产品特性

1）   EC NO：3.4.21.4

2）   CAS NO：9002-07-7

3）   同义名：Trypsin, from porcine pancreas, TPCK Treated; 胰酶，来源于牛胰腺，TPCK处理；

4）   级别：测序级（Sequencing Grade）

5）   分子量：23.8 kDa

6）   外观：类白色或微黄色结晶粉末

7）   溶解性：溶于1mM HCl（1mg/ml）

8）   比活力（胰蛋白酶）：≥10,000 BAEE units/mg protein

9）   比活力（糜蛋白酶）：≤0.1 BTEE units/mg protein

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，3年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1.      产品溶解

储存液制备：溶于1mM HCl（pH 3）配制母液，充分溶解，-20℃分装冻存，至少稳定保存~1年。加入Ca2+（20mM）能延缓胰蛋白酶的自溶和维持胰蛋白酶在溶液内的稳定性。

稳定性：胰蛋白酶在2.0M 尿素，2.0M 盐酸胍或0.1%（w/v）SDS维持绝大多数活性。在高pH（＞11）下不可逆变性，或添加三氯乙酸 （TCA，终浓度10%）沉淀样品，或加入高浓度尿素（＞6.5M）变性。为了去除所有胰蛋白酶活性，在1%（w/v）SDS下于100℃至少加热5min。

2.      产品用法

使用时，将储存液稀释在50mM NH4HCO3, pH 7.8或pH 7~8的合适缓冲液内。

用于酶切或蛋白测序分析的工作条件，可按照胰蛋白酶（TPCK处理）：目标蛋白的质量比（w/w）范围为1：20~1：50来加量。 于37℃反应2~3h。

注意事项

1）胰蛋白冻干粉产品常遇到的活性定义及其转换，

1 BAEE Unit：在25℃，pH 7.6 的条件下，以BAEE为底物，3.2 ml的反应体系中，A253吸光值每分钟会发生0.001的变化即为一个酶活单位。

1 TAME Unit： 在25℃，pH 8.2，0.001M Ca2+条件下，每分钟水解 1μmol p-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester（TAME）的用量。

1 USP Unit：在指定条件下，每分钟引起吸光值发生0.003的变化的样品活性。

1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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