FITC-Dextran 70 (FD70) FITC标记葡聚糖（70 kDa）

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FITC-Dextran FITC标记葡聚糖；FD40； FD70；TRITC-dextran 罗丹明标记葡聚糖；TD40；TD70；microcirculation 微循环研究；Cell permeability 细胞渗透性研究；Microfluorimetry 显微荧光测定法；

产品信息

【变更说明】：FITC-Dextran 70 (FD70)自2018.6月开始产品货号由原来的MS0995变更为MS0905。

产品描述

FITC标记葡聚糖（FITC-Dextran）是以天然葡聚糖B512F限制水解和分级纯化制备的不同分子量葡聚糖为底物，经荧光素标记所得的合成探针。荧光素基团通过一个稳定的硫代氨甲酰键连接到葡聚糖上（见附录图1. FITC-Dextran分子片段的结构特征），此标记步骤不会引起任何的葡聚糖降解。FITC-Dextran内每个葡萄糖单位含0.002~0.008 mol FITC，这一低水平的替换确保葡聚糖最小的结构变化，这一特性对渗透性研究来说是最基本需求。

FITC标记葡聚糖（FITC-Dextran）广泛用于微循环和细胞通透性研究，通过荧光显微测定法来检测。还可用于植物细胞壁多孔性和毛细血管通透性研究。小分子量的FITC-Dextran也能用来测定比如内吞和细胞连接通透性的生理过程。FITC-Dextran 70 (FD70)可能用作一种模式化合物来开发输送分子到原生质体的方法，或者用来研究水凝胶和脂质体等结构内的药物释放过程。也许还能用在微血管和单细胞层通透性研究。血浆蛋白不会结合FITC-Dextran。

本品是对平均分子量约70kDa葡聚糖进行标记的荧光素衍生物，即异硫氰酸荧光素葡聚糖70（fluorescein isothiocyanate dextran 70, FITC-dextran, FD70），以冻干粉形式提供，易溶于水，最大激发和发射波长分别为493和518nm。

产品特性

1）   CAS NO：60842-46-8

2）   化学名：Dextran(3´,6´dihydroxy-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H),9´-[9H]xanthen]-5(or 6)-yl)carbamothioate

, average Mw of approximately 70,000

3）   同义名：Fluorescein isothiocyanate-dextran 70; Fluoresceinyl thiocarbamoyl-dextran 70;

4）   分子量：average Mw 59,000-77,000

5）   置换率：0.002~0.008 mol FITC/glucose unit

6）   外观：黄色至深橘色粉末

7）   溶解性：易溶于水或盐溶液，也溶于DMSO，甲酰胺和某些其他极性有机溶剂，不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺（DMF）

8）   光谱特性：Ex/Em=493/518nm【由于荧光素基团的电荷状态依赖于缓冲液的pH和离子强度，因此荧光强度也会因这些参数的变化而变化。pH＞8观察到最大荧光强度。生理缓冲液能显著影响荧光强度，或得到增加或受到抑制。见附录图2. pH 4-9范围内FITC-Dextran 70的荧光变化（Em=520nm）】

保存与运输方法

保存：室温避光短期保存，2-8℃避光长期保存，保持密封干燥，至少3年稳定。

运输：室温运输。

产品稳定性

综合各种溶液体系和温度下FITC-Dextrans的稳定性测定，总的来说，体内外FITC-Dextrans的稳定性非常优秀。仅当pH＞9和上升温度内荧光素可能存在水解的风险。兔血浆、肌肉匀浆液、肝脏匀浆液和尿液内的FITC-Dextrans在37℃，至少3天内保持稳定，分子量不会发生变化，且未发现荧光素基团的释放。6%三氯乙酸内FITC-Dextrans室温稳定保存3天。【文献来源：P. Kurtzhals, C. Larsen and M. Johansen, High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】

硫代氨甲酰键的水解产生4-或5-氨基荧光素，能立即被HPLC定量检测到。未发表的研究数据显示，将高压处理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃长达5个月，发现仅在50℃情况下可能观察到微量（1%）的自由氨基荧光素含量增加。单独进行高压处理会引起2.7%的自由氨基荧光素产生。

其他的未发表研究显示，FITC-Dextran在pH4溶液35℃内能稳定保存高达1年。而在pH4，80℃内硫代氨甲酰键稳定30min，可能观察到葡聚糖的降解。pH9，35℃内存放一个月以上会发生一定量（24%）的荧光衰减。

一些研究证明，FITC-Dextrans在持续性实验（1-6天）的体内稳定性。【文献来源：N. Thorball, FITC-dextran tracers in microcirculatory and permeability studies using combined fluorescence Stereo Microscopy, Fluorescence Stereo-microscopy and electron microscopy, Histochemistry, 71(1981), 209-233.】

注意事项

1）  FITC-Dextrans易溶于水或盐溶液，可根据实际使用浓度配制适当浓度的母液。

2）  FITC-Dextrans溶液高压灭菌可能导致少量氨基荧光素的释放，若需要无菌，建议用过滤的方法来除菌。

3）  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录

图1. FITC-Dextran分子片段的结构特征

图2. pH 4-9范围内FITC-Dextran 70的荧光变化（Em=520nm）

 参考文献

[1]Tang, X., Yan, K., Wang, Y. et al. Activation of PPAR-β/δ Attenuates Brain Injury by Suppressing Inflammation and Apoptosis in a Collagenase-Induced Intracerebral Hemorrhage Mouse Model. Neurochem Res 45, 837–850 (2020). https://doi.org/10.1007/s11064-020-02956-w 

[2]BBB permeability was also evaluated using 70 kDa FITC-dextran. Mice (n = 5/group) were injected with 70 kDa FITC-dextran (MS0905; MKbio, Shanghai, China) in PBS at 50 mg/kg into the tail vein. Animals were perfused with pre-chilled PBS 15 min after the dextran injection. Following perfusion, the brain tissue was removed, homogenized with 20% trichloroacetic acid, and centrifuged at 12,000 rpm for 10 min. The supernatant was isolated, and relative fluorescence was measured at excitation and emission wavelengths of 493 and 520 nm. The results were calculated using FITC-dextran as the standard, and the values are expressed as ng/g brain tissue.

— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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