| 目录号 | MF2313-10000UL | 售价 | 1280.00元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 规格 | 100×100μl | 运输温度 | 干冰运输 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 其他名称 | 保存温度 | -80℃保存 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| CAS号 | / | 有效期 | 1年 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 应用 | 大肠杆菌克隆转化 | 订购数量 |
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产品简介: JM109 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞
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产品组分：
菌株描述 JM109菌株来源于E.coliK Strain，具recA1和endA1突变，是细菌转化以获取高质量质粒DNA或单链噬菌体DNA的理想菌株。JM109细胞中核酸内切酶（endA1）的突变显著改善微量DNA的质量，且重组（recA1）的突变提高克隆DNA的稳定性。携带的hsdR17基因型背景能防止克隆DNA不被EcoK内切酶系统所降解。F′附加体上laqIqZΔM15基因的存在使得重组质粒能进行蓝白斑筛选。 JM109菌株基因型：endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk–, mk+) relA1 supE44 Δ(lac-proAB) [F´ traD36 proAB laqIqZΔM15]
产品描述 本品是大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达109 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
保存与运输条件： 保存：-80℃保存，6个月有效。 运输：干冰运输。
注意事项 1） 感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。 2） 最好在冰上融化感受态细胞。 3） 进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。 4） 为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。 5） 产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。 6） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】 1） 从-80℃冰箱取出取感受态细胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物），用手轻弹管底轻轻混匀，冰浴静置25min。 2） 42℃水浴热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。 3） 向每个离心管中加入700 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。 4） 低速离心收菌（比如4000rpm，2min），留取100μl左右上清，用枪轻轻吹打重悬菌块，之后加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16h。 【注意】： a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可不用离心，直接取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，则通过离心（4,000 rpm，2min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。 b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。 c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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