目录号 | MX5317-25MG | 售价 | 1980.00元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
规格 | 25mg | 运输温度 | 冰袋运输 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
其他名称 | 5-Maleimido-fluorescein; 5-MF; N-(5-Fluoresceinyl)maleimide; 5-马来酰亚胺荧光素; | 保存温度 | -20℃避光干燥保存 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CAS号 | 75350-46-8 | 有效期 | 2年 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
应用 | 巯基染料 | 订购数量 |
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
产品简介: Fluorescein-5-maleimide (Thiol Dye) 荧光素-5-马来酰亚胺(巯基染料)
产品标签 Fluorescein-5-maleimide 荧光素-5-马来酰亚胺;ABD-F;Thiol Dye 巯基染料; WSP-1 (H2S Probe);CAS:75350-46-8;
产品信息
产品描述 荧光素-5-马来酰亚胺(Fluorescein-5-maleimide)是一种活化的荧光分子(Ex/Em=494/518nm),能非常容易的将荧光素连接到蛋白上。马来酰亚胺基团在pH 7的最佳体系内与半胱氨酸侧链上的巯基基团反应,形成一稳定的硫醚键。马来酰亚胺基团在pH 7时与游离巯基反应活性比胺基强~1000倍。而在pH>7.5与伯胺的反应活性提高,且会发生马来酰亚胺基团水解现象。荧光素-5-马来酰亚胺能用来标记蛋白,用于检测构象变化,多亚基复合物的组装和配基结合过程。
产品特性 1) CAS NO:75350-46-8 2) 化学名:1-(3',6'-Dihydroxy-3-oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthen]-5-yl)-1H-pyrrole-2,5-dione 3) 同义名:5-Maleimido-fluorescein; 5-MF; N-(5-Fluoresceinyl)maleimide; 5-马来酰亚胺荧光素; 4) 分子式:C24H13NO7 5) 分子量:427.37 6) 纯度:>97% 7) Ex/Em:494/518nm 8) 外观:浅橘色至深橘色和浅红色至深红色粉末 9) 溶解性:溶于DMSO、DMF 10) 反应基团:马来酰亚胺,与巯基反应(pH 6.5-7.5) 11)化学结构图:
保存与运输方法 保存:-20℃避光干燥保存,二年有效。 运输:冰袋运输。
注意事项 1) 马来酰亚胺对湿度很敏感。需将本品保存在-20℃,保持干燥。开盖前一定要将本品放到室温回温,以避免产品受潮而凝结成团。 2) 使用前才配制试剂。不可将试剂保存在水溶液内。 3) 用荧光素-5-马来酰亚胺标记的分子必须含有游离的巯基(-SH)。某些含巯基分子在溶液中可能被氧化,形成二硫键,从而不能与马来酰亚胺反应。二硫键可被还原生成游离巯基。还原后,大部分的还原剂必须在偶联反应前去除。 4) 偶联反应体系内不要引入含巯基组分,因其会与马来酰亚胺反应,进而抑制和降低目的分子的连接率。 5) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
标记方法【仅做参考】 需根据具体应用来优化以下标记步骤。 A、 标记蛋白 1) 于20mM 磷酸钠缓冲液,150mM NaCl,pH 7.2或其他适合的缓冲液(pH 6.5-7.5)内准备含巯基样品。为了预防金属催化生成二硫键,体系内加入终浓度5-10mM的EDTA。 2) 往样品内加入摩尔量远高的荧光素-5-马来酰亚胺。通常情况,使用25倍高的摩尔比能得到理想结果。【注意】:荧光素-5-马来酰亚胺能直接加入水溶性溶液(高达1mM浓度)或首先溶解在DMF(10mM)在加入蛋白溶液中。 3) 进行偶联反应,室温2h或4℃过夜。 4) 用截留分子量(MWCO)为10 kD的脱盐柱或透析袋来去除未结合的荧光素。 5) 将偶联好的蛋白或多肽避光保存在4℃,稳定保存高达一个月。或按照单次用量分装,保存在-20℃。
B、 计算标记效率 【注意】:为了得到最佳的结果和精确测定标记率(F/P值),需完全去除未反应的荧光素。有必要稀释少量脱盐或透析样本。 1) 使用1cm比色皿,测定标记蛋白在280nm和495nm处的吸光值。 2) 计算蛋白浓度。 ε=蛋白摩尔吸光系数(比如,IgG的摩尔吸光系数~210,000 M-1cm-1) Amax=A495 CF=校正系数=A280/Amax=0.3000 ×稀释倍数 3) 计算标记效率 ε´=荧光素摩尔吸光系数:68,000 M-1cm-1 摩尔荧光素/摩尔蛋白= × 稀释倍数
相关产品
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本,以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
|