8-Hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid Trisodium Salt (HPTS, Pyranine) 8-羟基芘-1,3,6-三磺酸 三钠盐

产品关键词：

HPTS 8-羟基芘-1,3,6-三磺酸三钠盐；pH sensor 质子探针；LysoSensor Yellow/Blue DND-160 L7545；BCECF, AM；Leadmium™ Green镉离子探针；CAS NO：6358-69-6；

产品信息

【温馨提示j】：HPTS（Pyranine）是一款膜非渗透性的pH荧光探针；

【温馨提示k】：HPTS (free base) 的CAS：27928-00-3；HPTS (trisodium salt) 的CAS：6358-69-6；

产品描述

8-羟基芘-1,3,6-三磺酸（8-Hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid, HPTS，CAS:27928-00-3），也称为溶剂绿7（Solvent Green 7），在生理范围内是一种有用的pH指示剂。在403nm和450nm处的最大激发波长，以及在510nm的最大发射波长下测定的荧光强度，随着pH从5增加到9的过程中，荧光分别随之降低和增高[1]。

HPTS曾被用于激发比率型的成像分析，从而监测内吞性脂质体、酸性细胞器或活细胞浆内的pH变化，以及pH值的测定[1-2]。HPTS不具有膜渗透性，可通过微注射、电转或脂质体介导的运输或通过ATP门控的离子通道进入胞内[3]。HPTS也可通过膜片钳技术加载进入胞内[4]。据报道HPTS比BCECF具更低的光毒性[3]。

本品是8-羟基芘-1,3,6-三磺酸的三钠盐形式（8-Hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid Trisodium Salt），CAS：6358-69-6，冻干粉形式，易溶于水。

产品特性

1） CAS NO.：6358-69-6

2） MDL NO.:MFCD00037575

3） 化学名：8-hydroxy-1,3,6-pyrenetrisulfonic acid, trisodium salt

4） 同义名：Trisodium 8-hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonate; 11389 Green; C.I. 59040; C.I. Solvent Green 7; D&C Green 8; Japan Green 204; Pyranine 10G; Yellow Pyracide G;Pyranine;溶剂绿7；

5） 分子式：C16H7Na3O10S3

6） 分子量：524.39

7） 纯度：≥98% (HPLC)

8） Ex/Em：454/520nm (in water)

9） 外观：黄色至绿色粉末

10） 溶解性：溶于水（50mg/ml）

11） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃避光干燥保存，短期频繁使用亦可放到+4℃保存，至少2年有效。 

运输：室温运输。

注意事项

1） 关于化合物溶解性：产品特性内的“≥”表明溶于标示浓度，但饱和溶解度未知。不同批次化合物的溶解度会有差异。

2） 为了让化合物更好的溶解，可通过37℃加热或（和）超声波水浴中震动片刻来处理。若实验所需浓度过大甚至达产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。

3） HPTS在水溶液中不是特别稳定，建议条件允许的话，初次使用本品时将其置于室温回温后，分装成小量粉末（避光干燥保存），之后取一管用水溶解配制成母液（比如：50mM），然后用合适的生理性溶液稀释到所需的工作浓度。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例（来自文献，仅做交流学习用）

Ref1）Scarciglia, A.; Di Gregorio, E.; Aime, S.; Ferrauto, G. Effects of Cations on HPTS Fluorescence and Quantification of Free Gadolinium Ions in Solution; Assessment of Intracellular Release of Gd3+ from Gd-Based MRI Contrast Agents. Molecules 2022, 27, 2490. https://doi.org/10.3390/molecules27082490

展示内容：HPTS溶于水和不同缓冲介质内荧光值与pH的变化曲线。

Figure 1. (A) Equilibrium reaction with calculated pKa value. (B) Excitation and emission spectra in water at variable pH values. (C) Sigmoidal behavior of the emission intensity at variable pH in water. (D) Sigmoidal behavior of the emission intensity at variable pH in different media.

Ref2）Barbez E, Dünser K, Gaidora A, Lendl T, Busch W. Auxin steers root cell expansion via apoplastic pH regulation in Arabidopsis thaliana. Proc Natl Acad Sci U S A. 2017 Jun 13;114(24):E4884-E4893. doi: 10.1073/pnas.1613499114. Epub 2017 May 30. PMID: 28559333; PMCID: PMC5474774.

实验目的：用HTPS评估质外体pH（Apoplastic pH）。

染色方法：4d-old的幼苗用不同pH值的生长培养基（含1mM HPTS，从100mM水溶母液中稀释）避光孵育30min。之后将这些幼苗置于载玻片上，用含HPTS的相同生长培养基封片，用盖玻片盖片等待共聚焦成像分析。质子化形式的HPTS（激发405nm，发射514nm）和去质子化形式的HPTS（激发458nm（Zeiss）或470nm（LEICA）,发射514nm）用63×物镜观察。Fiji软件进行图片处理。

染色示例：

Fig.In vivo HPTS calibration. Apoplastic epidermal root meristem 458/405 values of seedlings incubated for 30 min in liquid growth medium with pH 4.6–6.4. x-axis: mean 458/405 value. y-axis: pH. (Top) Regression analysis derived-equation enabling apoplastic pH calculation from the obtained 458/405 values.

参考文献

[1]Daleke, D.L., Hong, K., and Papahadjopoulos, D. Endocytosis of liposomes by macrophages: binding, acidification and leakage of liposomes monitored by a new fluorescence assay. Biochim. Biophys. Acta 1024(2), 352-366 (1990).

[2]Han, J., and Burgess, K. Fluorescent indicators for intracellular pH. Chem. Revs. 110(5), 2709-2728 (2010).

[3]Gan BS, Krump E, Shrode LD, Grinstein S. Loading pyranine via purinergic receptors or hypotonic stress for measurement of cytosolic pH by imaging. Am J Physiol. 1998 Oct;275(4):C1158-66. doi: 10.1152/ajpcell.1998.275.4.C1158. PMID: 9755070.

[4]Willoughby D, Thomas R, Schwiening C. The effects of intracellular pH changes on resting cytosolic calcium in voltage-clamped snail neurones. J Physiol. 2001 Feb 1;530(Pt 3):405-16. PMID: 11158272; PMCID: PMC2278427.

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