目录号 | MX4611-1MG | 售价 | 1568.00元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
规格 | 1mg | 运输温度 | 冰袋 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
其他名称 | e-Coelenterazine; e-CTZ; Coelenterazine-E; CTZ-E; CLZN-e; e-腔肠素; | 保存温度 | -20°C避光干燥保存 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CAS号 | 114496-02-5 | 有效期 | 1年 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
应用 | 钙离子水平检测; | 订购数量 |
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产品简介: Coelenterazine e 腔肠素e
产品关键词: Coelenterazine e 腔肠素e;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:114496-02-5;
产品信息
【温馨提示】:见我司懋康生物(maokangbio)提供的活体成像底物-腔肠素及衍生物产品专题。
产品描述 腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);
图1. 海肾荧光素酶(Rluc)催腔肠素发光的反应流程
天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。
腔肠素e(Coelenterazine e,CTZ-e),是一种天然腔肠素衍生物,带有一个额外的乙基基团,从而形成一个额外的环形结构,最早由Shimomura进行描述。CTZ-e是一款优秀的海肾荧光素酶(Rluc)底物。CTZ-e产生的荧光接近于CTZ-Native的40%以上,虽然前者的初始荧光强度比后者高7倍多。CTZ-e/海肾荧光素酶的发射光谱有两个峰值,分别为418nm和475nm。
CTZ-e也是一款良好的脱酰基水母发光蛋白(APO)底物,与CTZ-Native相比,CTZ-e形成的水母蛋白复合物具有更快的荧光上升时间,并且呈现两个发射吸收峰(分别在405nm和465nm),吸收峰高度的比值取决于pCa 5-7范围内的钙离子浓度。这一双吸收峰特征使得CTZ-e/APO通过吸收峰强度的比例来测定钙离子成为可能。
产品描述 1) CAS NO:114496-02-5 2) 化学名:12-Benzyl-8-hydroxy-2-(4-hydroxybenzyl)-5,6-dihydrobenzo[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(11H)- one; Benz[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(6H)-one,5,11-dihydro-8-hydroxy-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-12 -(phenylmethyl); 3) 同义名:e-Coelenterazine; e-CTZ; Coelenterazine-E; CTZ-E; CLZN-e; e-腔肠素; 4) 分子式:C28H23N3O3 5) 分子量:449.5 g/mol 6) 纯度:>95% 7) 外观:黄色至橙色固体 8) 溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO 9) 化学结构式:
保存与运输方法 保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。 运输:冰袋运输。
注意事项 1) 腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。 2) 腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。 3) 商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。 4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1. 实验前将CTZ-e从冰箱取出回至室温,之后低速离心使得管内固体(或粉末)落到管底。 2. 用酸化、脱气体的无水乙醇溶解固体(或粉末),混匀,使其浓度为1mg/ml。 3. 最好于实验前才对乙醇储存液进行稀释,再用于所有的鲁米诺分析或实验。根据具体的工作体系选择合适的水溶性缓冲液对乙醇储存液进行稀释。(比如,100μM 用于荧光计分析) 4. 将未用完的CTZ-e溶液保存在-80℃,尽快用完。不可将水溶性工作液进行保存(会被氧化从而降解)。
表1 腔肠素e与天然腔肠素的差异
附录1 天然腔肠素及其衍生物的光谱特性
附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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