目录号 | MX4609-10MG | 售价 | 15748.00元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
规格 | 20×500μg | 运输温度 | 冰袋运输 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
其他名称 | Injectable h-Coelenterazine for in vivo image | 保存温度 | -20°C干燥保存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CAS号 | 50909-86-9 | 有效期 | 1年 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
应用 | 发光蛋白和海肾报告基因底物,活体成像研究 | 订购数量 |
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产品简介: Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h
产品关键词: Coelenterazine (CTZ) 腔肠素;CTZ h 天然腔肠素h;海肾荧光素酶(Rluc);分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);In vivo bioluminescence imaging 活体动物体内成像技术;CAS NO:50909-86-9;
产品信息
【温馨提示】:见我司懋康生物(maokangbio)提供的活体成像底物-腔肠素及衍生物产品专题。
产品描述 腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程中发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);
图1. 海肾荧光素酶(Rluc)催腔肠素发光的反应流程
腔肠素h(Coelenterazine h,CTZ-h)是天然腔肠素(Coelenterazine native,CTZ-native)的脱羟基衍生物。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比CTZ-native形成的水母发光蛋白复合物的荧光强度高10倍以上(最大发射波长~466nm,半衰期为0.6-1.2sec)。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比天然发光复合物对钙离子灵敏度更高,是一种检测钙离子浓度微小变化的实用探针。另外,CTZ-h是海肾荧光素酶(Renilla luciferase,Rluc)的底物,适用于体内外报告基因分析。
本品为专供体内成像研究的注射用腔肠素h(Injectable h-Coelenterazine),不仅含有超纯的腔肠素h(>99%),还提供特别设计的Inject-Diluent溶剂,能够最大程度的溶解腔肠素h,从而最小化体内注射体积。另外,与传统乙醇溶解的腔肠素h相比,用Inject-Diluent溶解的腔肠素h能得到更好的荧光信号。
产品组分
保存与运输方法 保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。 运输:冰袋运输。
注意事项 1) 本品特别开发适用于体内实验。若仅做体外实验,可使用我司提供的天然腔肠素(Coelenterazine Native)(#MX4606-1MG)或腔肠素h(Coelenterazine h)(#MX4608-1MG)。 2) 发光蛋白与荧光素酶是完全不同的,比如腔肠素h(CTZ-h)适合用作海肾荧光素酶(Rluc)的底物,但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)的底物。天然腔肠素(CTZ-native)是唯一适合分泌型膜锚定荧光素酶的一种报告基因底物。 3) 商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。 4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤 1. 使用装有23 gauge或更小针头的0.5-1.0ml注射器,吸取150μl 温热(35-50℃)的Inject-Diluent。 2. 将150μl Inject-Diluent打入Native Coelenterazine瓶内,使用针头和注射器上下吸打或低速涡旋,直至看到完全透明溶液,此时得到腔肠素溶液浓度为3.33mg/ml。如果溶液没有完全透明,用水浴锅或加热板在60-80℃加热几分钟,检查完全透明。 3. 按下表1,用胰岛素注射器吸取15-75μl充分溶解的腔肠素h溶液(3.33mg/ml),通过尾静脉注射到动物体内。检查,排气,冲洗针头。使用胰岛素注射器的优势在于很低的液体滞留体积(<2μl)。缓慢注射。
建议按照表1单只小鼠(25g体重)的腔肠素h溶液(3.33mg/ml)注射剂量表
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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