产品简介:
JM110 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞
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货号
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产品名称
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规格
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价格（元）
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MF2320-1000UL
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JM110 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞
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10×100μl
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280
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MF2320-5000UL
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JM110 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞
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50×100μl
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1280
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产品组分
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组分编号
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组分名称
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货号（规格）
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MF2320-1000UL
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MF2320-5000UL
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MF2320-A
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JM110 Competent Cell
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10×100μl
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50×100μl
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MF2320-B
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Control Vector puC19,10pg/μl
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10μl
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10μl
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菌株描述
JM110菌株适用于制备不含Dam或Dcm甲基化的质粒或噬菌粒DNA，使得DNA能被一种或更多甲基化敏感的限制性内切酶酶切。
JM110菌株缺乏绝大多数大肠杆菌菌株内发现的两种甲基化酶（Dam和Dcm）。Dam甲基化酶识别DNA序列GATC，在N-6位置将腺嘌呤残基甲基化；而Dcm甲基化酶识别DNA序列CCAGG和CCTGG，在C-5位置将内部胞嘧啶甲基化。JM110菌株在F′附加体上lacIqZΔM15基因的存在，使其能对重组质粒进行蓝白斑筛选。JM110菌株具有链霉素抗性。
JM110菌株基因型：rpsL (StrR) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44∆(lac-proAB) [F ́ traD36 proAB lacIqZ∆M15]
产品描述
本品是大肠杆菌JM110菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达107 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
保存与运输条件：
保存：-80℃保存，六个月有效。
运输：干冰运输。
注意事项
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感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。
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最好在冰上融化感受态细胞。
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进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。
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转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
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为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。
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产品包装内含载体pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。
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为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】
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从-80℃取出TOP10感受态细胞迅速置于冰浴中5min使其完全融化。
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向融化的感受态细胞中加入目的DNA（质粒或连接产物），用手轻弹混匀（避免用移液枪上下吹打），冰浴静置25min。
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42℃水浴热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。
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向每个离心管中加入700 μl无菌培养基（2YT或LB，不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
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复苏完成后，5000rpm离心1min收集菌体，留100μl左右上清轻轻吹打重悬菌体并涂布到无菌固体培养基（2YT或LB，含相应抗生素）上。
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将平板正置于室温（或37℃）直至液体被吸收，之后，37℃培养箱内倒置培养过夜。如果进行蓝白斑筛选，至少培养13h。
【注意】：
a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，可取200-300 μl转化产物涂布平板。若预计的克隆较少，可通过离心（5,000 rpm，1min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。
b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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货号
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名称
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规格
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MF2311-2000UL
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DH5α Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞
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20×100μl
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MF2312-2000UL
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BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大肠杆菌感受态细胞
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10×100μl
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MS0021-10G
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Chloramphenicol, USP Grade氯霉素
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10g
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MS0018-10G
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Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠
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10g
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MS0017-5G
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Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐
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5g
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MS0019-10G
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Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素
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10g
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MS0014-1G
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Rifampicin, USP Grade利福平
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1g
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MF2001-1G
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X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
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1g
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MF2002-1G
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IPTG异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
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1g
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附表1固体和液体LB培养基配方
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组分Component
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LB（液体）/升
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LB（固体）/升
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胰蛋白胨Tryptone
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10g
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10g
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酵母提取物Yeast extract
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5g
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5g
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氯化钠NaCl
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10g
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10g
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1N NaOH
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调整pH至7.0
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调整pH至7.0
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琼脂Agar
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/
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15g
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附表2固体和液体2-YT培养基配方
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组分Component
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2YT（液体）/升
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2YT（固体）/升
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胰蛋白胨Tryptone
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16g
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16g
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酵母提取物Yeast extract
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10g
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10g
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NaCl
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5g
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5g
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1N NaOH
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调整pH至7.0
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调整pH至7.0
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琼脂Agar
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/
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15g
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
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