| 目录号 | MF2312-10000UL | 售价 | 1280.00元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 规格 | 100×100μl | 运输温度 | 干冰运输 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 其他名称 | 保存温度 | -80ºC干燥保存 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| CAS号 | / | 有效期 | 1年 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 应用 | 大肠杆菌克隆转化 | 订购数量 |
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
产品简介: TOP10 Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞
产品订购：更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-54736159 。
【好消息】：见我司的感受态细胞促销活动。买感受态细胞得京东卡，发表使用评论，赢红包，双重惊喜，行动起来啦。
产品组分：
菌株描述 TOP10菌株类似于DH10B菌株，具有以下特征：1）hsdR使其对PCR扩增产物来源非甲基化DNA实现有效转化；2）mcrA使其对基因组制备物来源的甲基化DNA实现有效转化；3）lacZΔM15使其能对重组克隆实现蓝白斑筛选；4）endA1确保得到更高纯化的DNA，下游应用得到更好的结果，归因于内切酶I非特异性酶切活性的缺失；5）recA1降低克隆DNA非特异性重组的频率。TOP10是目前实验室最常用的克隆菌株之一，适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定复制。
TOP10菌株基因型：F- mcrA Δ( mrr-hsdRMS- mcrBC) Φ80 lacZΔM15 Δ lacX74 recA1 araΔ139 Δ( ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG
产品描述 本品是TOP10菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率＞5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
保存与运输条件： 保存：-80℃保存，6个月有效。 运输：干冰运输。
注意事项 1） 感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。 2） 最好在冰上融化感受态细胞。 3） 转化高浓度质粒或高效连接产物需相应减少最终涂板的菌量。 4） 进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。 5） 为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。 6） 产品包装内含载体pUC19 DNA(10 pg/μl)，供对照实验用。 7） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】 1.1 从-80℃取出TOP10感受态细胞迅速置于冰浴中5min使其完全融化。 1.2 向融化的感受态细胞中加入目的DNA（质粒或连接产物），用手轻弹混匀（避免用移液枪上下吹打），冰浴静置25min。 1.3 42℃水浴热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。 1.4 向每个离心管中加入700 μl无菌培养基（2YT或LB，不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。 1.5 复苏完成后，5000rpm离心1min收集菌体，留100μl左右上清轻轻吹打重悬菌体并涂布到无菌固体培养基（2YT或LB，含相应抗生素）上。 1.6 将平板正置于室温（或37℃）直至液体被吸收，之后，37℃培养箱内倒置培养过夜。如果进行蓝白斑筛选，至少培养13h。
【注意】： a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，可取200-300 μl转化产物涂布平板。若预计的克隆较少，可通过离心（5,000 rpm，1min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。 b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。 c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
相关产品
附表1固体和液体LB培养基配方
附表2固体和液体2-YT培养基配方
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。 |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
