WSP-5 (H2S Probe) 硫化氢荧光探针

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WSP-1 (Washington State Probe-1)；WSP-5；硫化氢（H2S）特异性探针；PAG (DL-propargylglicine) 硫化氢合成抑制剂；Hypotaurine  H2S清除剂；CAS NO：1593024-78-2；

产品信息

产品描述

WSP-5 (Washington State Probe-5)是由M. Xian团队开发的一种含活性二硫化物的荧光探针，特别设计用来快速检测生物样本和细胞内的硫化氢（H2S）。通过基于反应的荧光开启策略，WSP-5选择性且快速与H2S反应，产生一种荧光化合物（Ex=502nm，Em=525nm）。与WSP-1（货号：MX5301-1MG）相比，WSP-5靶向H2S表现出更快的荧光开启速率（60 vs. 130-fold）和更灵敏的检测极限（47 vs. 60 nM）。

参考文献：Peng B et al. et al. Fluorescent probes based on nucleophilic substitution-cyclization for hydrogen sulfide detection and bioimaging. Chemistry. 2014 Jan 20;20(4):1010-6.

产品特性

1）   CAS NO：1593024-78-2

2）   化学名：3-oxo-3H-spiro[isobenzofuran-1,9'-xanthene]-3',6'-diyl bis(2-(pyridin-2-yldisulfanyl)benzoate)

3）   同义名：Washington State Probe-5；硫化氢荧光探针；H2S荧光探针；

4）   分子式：C44H26N2O7S4

5）   分子量：822.9

6）   纯度：≥95%

7）   Ex/Em：502/525nm

8）   外观：浅黄色固体

9）   溶解性：溶于DMSO（~25mg/ml）、DMF（~30mg/ml）

10）化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20ºC避光干燥保存，至少2年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法【见附录使用延伸资料阅读】

1、  储存液制备

将低温保存的产品从冰箱取出，置于室温回温至少20min。低速离心3-5min。之后往瓶内加入适量无水DMSO充分溶解配成15mM储存液（比如，1mg WSP-5（Mw: 591.7）加81μl DMSO）或更低浓度的储存液，请根据实际情况来调整。按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，至少3个月稳定。

2、  工作浓度

正式实验前，取15mM或其他浓度储存液用适当缓冲液或培养基稀释到所需工作浓度即可。具体的工作浓度请参考文献或根据自身实验需求来进行优化调整。参考下方一些实验数据，来自公开文献，仅作参考。

应用示例1：HeLa细胞用DMEM+10% FBS培养2天。成像前一天，细胞转移到24孔板内。检测前，贴壁细胞用FBS-free DMEM清洗一遍。对于胞内H2S成像，细胞用含WSP-5（50μM）的FBS-free DMEM于37℃，孵育30min。用PBS（pH 7.4）清洗取出多余探针，然后细胞用溶于PBS buffer（pH 7.4，100μM CTAB）的NaHS（100μM）孵育30min。用PBS（pH 7.4）清洗细胞3遍后，荧光显微镜成像（490nm激发，绿色通道）。

文献来源：Peng B et al. Nucleophilic substitution-cyclization based fluorescent probes for hydrogen sulfide detection and bioimaging. Chemistry. 2014 Jan 20;20(4):1010-6.

应用示例2：SHSY5Y和U87MG细胞用待研究的缓释天然硫化氢供体HBITC（40, 60, 80 μM）或等体积含DMSO的培养基孵育。之后细胞用硫化氢探针WSP-5（50 μM）和CTAB（100μM in PBS）避光孵育20min。用PBS清洗后，荧光显微镜成像检测。文献来源：Jurkowska H et al. New aspects of antiproliferative activity of 4-hydroxybenzyl isothiocyanate, a natural H2S-donor. Amino Acids. 2018 Jun;50(6):699-709.

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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引用文献

He T et al. Tumor pH-responsive metastable-phase manganese sulfide nanotheranostics for traceable hydrogen sulfide gas therapy primed chemodynamic therapy. Theranostics. 2020; 10(6): 2453–2462.

H2S Fluorescent Probe WSP-5 was purchased from Shanghai Maokang Biotechnology Co., Ltd. (Shanghai, China). H2S gas released in 4T1 cells was observed by adding a Washington State Probe-5 (WSP-5) H2S fluorescent probe (FigureFigure33H). It is based on 2-pyridyl disulfide fluorescent, which release the fluorophores and turn on the fluorescence by tandem nucleophilic subsitution-cyclization reaction. WSP-5 probe can selectively and rapidly react with H2S in cells to generate a green fluorescence signal.

[2]

Longna Li, Yuhao Liu, Shu Wang, Jianxin Zou, Wenjiang Ding, Wenbiao Shen. Magnesium Hydride-Mediated Sustainable Hydrogen Supply Prolongs the Vase Life of Cut Carnation Flowers via Hydrogen Sulfide. Front. Plant Sci., 09 December 2020 | https://doi.org/10.3389/fpls.2020.595376

H2S fluorescent probe 3-oxo-3H-spiro[isobenzofuran-1,9’-xanthene]-3’,6’-diyl bis(2-(pyridin-2-yldisulfanyl)benzoate) (WSP-5; MKBio, Shanghai, China) was used to monitored endogenous H2S in cut flowers (Peng et al., 2014). The concentrations of these chemicals were selected based on the results of pilot experiments.

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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