Rabbit IHC Kit 免疫组化试剂盒（兔一抗来源）

产品特点：

类似于Invitrogen Histostain-Plus IHC Kit，使用 LAB-SA (Labeled Streptavidin-Biotin)+DAB显色系统，适用于广谱的免疫组化检测。

产品信息

产品描述

免疫组化试剂盒（兔一抗来源）（Rabbit IHC Kit）是一款特异性检测一抗来源为兔单克隆或多克隆的免疫组化试剂盒，检测原理基于高特异性和灵敏度的生物素-链霉亲和素信号放大系统，以及辣根过氧化物酶催化底物DAB显色，从而识别目标抗原的过程。本品适用于石蜡切片、冰冻切片、细胞涂片以及血液标本。

产品组成

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，1年有效，不可冻存。

运输：冰袋运输。

注意事项

1. 建议检测目的标本的同时，设置阴性对照和阳性对照。

2. DAB具潜在致癌性，操作时注意防护，避免直接接触皮肤。

3. DAB工作液需现配现用，避光放置，需在30min内完成染色。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、用户自行准备试剂

1.1 二甲苯、乙醇、无水甲醇

1.2 蒸馏水或去离子水

1.3 30% H2O2

1.4 1×PBS, pH 7.2-7.4

1.5 一抗（宿主为兔）

1.6 苏木素染色液

1.7 中性树胶封片

二、染色步骤（以石蜡切片为例）

1. 标本制备

石蜡切片用二甲苯常规脱蜡、入水、抗原修复（按照一抗说明书推荐方法或实验室标准流程进行操作）。

染色前用1×PBS浸泡组织或细胞涂片10min。从此步开始，严禁标本或组织切片干燥

2. 染色流程

2.1 将石蜡切片放入3% H2O2-甲醇溶液中浸泡10min，目的消除内源性过氧化氢酶活性。

2.2 用PBS清洗3次，2 min/次。

2.3 加一滴（50μl）10%山羊血清封闭液于组织上（需完全覆盖组织），室温孵育10min。

2.4 倒掉或吸尽液体（不可冲洗）。

2.5 每张切片加100μl或适量宿主为兔的一抗（需完全覆盖组织），湿盒内孵育30-60min。

2.6 用PBS清洗3次，2 min/次。

2.7 每张切片加一滴（50μl）生物素化抗兔二抗（需完全覆盖组织），孵育10min。

2.8 用PBS清洗3次，2 min/次。

2.9 每张切片加一滴（50μl）HRP标记链霉亲和素（需完全覆盖组织），孵育10min。

2.10 用PBS清洗3次，2 min/次。

2.11 制备DAB显色工作液，需要现配现用，请根据具体需染色的切片数来配制。

此处为1张切片用量的配制方法：a）取2.5µl 20×DAB底物缓冲液加入到50µl蒸馏水或去离子水，混匀；b）分别取2.5µl 20×DAB底物浓缩液，2.5µl 20×过氧化氢浓缩液到a）中混合溶液，充分混匀，避光保存。

2.12 每张切片加一滴（50μl）新鲜配制的DAB显色工作液，室温显色2-5min（可在显微镜下控制显色程度）。

2.13 自来水充分冲洗；

2.14 苏木素染色液复染。盐酸酒精分化。

2.15 脱水、透明、封片、镜检。

3. 染色结果

阳性染色：在抗原定位处被染成棕黄或棕褐色。

相关产品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。