目录号 | MF2521-1G | 售价 | 386.00元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
规格 | 1g | 运输温度 | 冰袋运输 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
其他名称 | 5-fluoro-2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid; 5-Fluorouracil-4-carboxylic acid; | 保存温度 | -20℃干燥保存 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
CAS号 | 703-95-7 | 有效期 | 2年 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
应用 | 酵母反选择试剂 | 订购数量 |
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产品简介: 5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸
产品标签 5-Fluoroorotic Acid (5-FOA),Counter-selection agent 负选择(反选择),Yeast two-hybrid system 酵母双杂交系统,YNB 酵母氮源基础,CAS:703-95-7
产品信息
【温馨提示】:见我司整理的酵母双杂交(Yeast two-hybrid assay)检测产品专题。
产品描述 5-氟乳清酸(5-Fluoroorotic Acid,5-FOA)用于酵母负选择是一种常用的分子遗传筛选方法。酵母菌质粒清除、质粒穿梭、等位置换和双杂交筛选都会用到5-FOA。5-FOA自身对酵母细胞无毒,但功能型URA3基因能编码表达乳清酸核苷-5′-单磷酸脱羧酶(OMP脱羧酶),将其转化为有毒形式(如5-氟尿嘧啶),从而使得酵母细胞无法生长。因此,在添加尿嘧啶的5-FOA培养基中,携带URA3突变基因的酵母菌能正常生长。5-FOA主要用于酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae(URA3)的鉴定和筛选,虽然曾用于其他菌株,包括粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombe(URA4 and URA5),白色念珠菌Candida albicans(URA3)和大肠杆菌E. coli(pyrF)。酵母双杂交系统中5-FOA的使用允许构建激活结构域杂交文库来鉴定蛋白-蛋白相互作用。
产品特性 1)CAS NO:703-95-7 2)同义名:5-fluoro-2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid; 5-Fluorouracil-4-carboxylic acid; 5-Fluoro orotic acid; 2,6-Dihydroxy-5-fluoropyrimidine-4-carboxylic acid; 3)分子式:C5H3FN2O4 4)分子量:174.10 g/mol 5)纯度:>99% 6)外观:类白色至淡黄色粉末 7)熔点:~258°C(高温非常稳定,如煮沸和高压灭菌) 8)溶解性:溶于DMSO,微溶于水,乙醇,甲醇 9)化学结构:
保存与运输方法 保存:-20℃干燥保存,2年有效。 运输:冰袋运输。
使用方法 一、5-FOA培养基配置方法(以粉末形式) 1.1 配制400ml标准的酵母合成培养基,并加入1g 5-FOA(#MF2521)粉末,充分溶解混匀,0.22µm滤膜过滤除菌。【或者可当高压灭菌的标准培养基冷却到55ºC后再加入1g 5-FOA粉末,然后过滤除菌。】 1.2 高压灭菌琼脂粉/水混合液(浓度为20g/600ml),使其冷却到55ºC。 1.3 将温热的5-FOA培养液倒入琼脂粉/水溶液内,搅匀后,倒平板。
二、5-FOA培养基配置方法(以储存液形式) 2.1 取100mg 5-FOA冻干粉,用1ml无水DMSO充分溶解,配制成100mg/ml(100×)的储存液。短期频繁使用,置于4ºC避光保存;长期保存,根据单次用量分装冻存,-20ºC保存6个月有效。 2.2 根据实验室认可的方法,配制标准的酵母合成培养基(含琼脂粉),高压灭菌。放入转子一起灭菌以便后续搅匀组分用。 2.3 冷却到55ºC后加入任何热敏感组分(氨基酸,糖类或者其他成分)。 2.4 每升培养基加10ml100× 5-FOA储存液,混匀后,倒平板。
注意事项 1)5-FOA微溶于水,粉末溶解过程中可加热(如55-65ºC)助溶30min~1h直至完全溶解。5-FOA极易溶于DMSO,但高浓度DMSO对细胞有毒,需注意控制DMSO的终浓度。 2)5-FOA培养基不用调节pH。 3)5-FOA培养基平板置于4ºC避光保存,可存放3个月,建议用封口膜封口四周
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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