| 目录号 | MP1506-100ML | 售价 | 225.00元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 规格 | 100ml | 运输温度 | 冰袋 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 其他名称 | SDS Lysis Buffer SDS裂解液 | 保存温度 | -20℃冻存 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| CAS号 | N/A | 有效期 | 1年 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 应用 | SDS Lysis Buffer SDS裂解液 | 订购数量 |
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产品简介: SDS Lysis Buffer SDS裂解液
产品标签： SDS裂解液；RIPA Lysis Buffer RIPA裂解液；细胞/组织裂解液；总蛋白提取；BCA蛋白浓度检测试剂盒；Bradford蛋白浓度测定试剂盒；PMSF；
产品信息
【温馨提示】：见我司懋康生物（MKBIO）整理的组织/细胞裂解液重要特点以及选择指南。
产品描述 SDS，也称十二烷基硫酸钠（Sodium Dodecyl Sulfate），是一种常见的阴离子去垢剂，常用于变性蛋白。 SDS裂解液（SDS Lysis Buffer）是一种比较强烈的细胞组织裂解液，主要成分为50mM Tris-HCl（pH 8.1），1% SDS以及焦磷酸钠，甘油磷酸钠、正钒酸钠，氟化钠，EDTA和抑肽酶等多种抑制剂，可广谱且有效抑制蛋白降解，经本品裂解所得的蛋白样品，适用于常规的蛋白免疫印迹（Western Blot），染色质免疫共沉淀（ChIP）等实验。经本品裂解收集的蛋白样品，可使用增强型BCA蛋白浓度测定试剂盒（#MP1902）测定总蛋白浓度。由于本品含有较高浓度的去垢剂，不适合用Bradford法（#MP1903）来测定总蛋白浓度。
产品组成
保存与运输方法 保存：-20℃冻存，1年稳定。 运输：冰袋运输。
注意事项 1） 为了取得最佳的使用效果，建议第一次使用本品的时候将裂解液分装冻存，避免反复冻融。 2） 裂解样品的所有步骤需在冰上或4℃进行。 3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法 A， 培养的细胞样品 1） 充分融解SDS裂解液，之后混匀。取适当量的裂解液，使用前数分钟内加入PMSF（100mM），使其最终浓度为1mM。 2） 贴壁细胞：吸除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍（如果血清中的蛋白没有干扰，可忽略此步）。按照六孔板的每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加量。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-3秒后，细胞就会被裂解。如果提取的蛋白样品用于ChIP，应置于冰上或4℃裂解15~30min。 3） 悬浮细胞：离心收集细胞，用手指弹散细胞。按照六孔板的每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。如果提取的蛋白样品用于ChIP，应置于冰上或4℃裂解15~ 30min。 4） 充分裂解后，10,000-14,000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、WB和ChIP等操作。 【裂解液用量说明】：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。如果用于ChIP，建议6孔板每孔细胞至少加入200μl裂解液。
B， 组织样品 1） 将组织剪切成细小的碎片。 2） 充分融解SDS裂解液，之后混匀。取适当量的裂解液，使用前数分钟内加入PMSF（100mM），使其最终浓度为1mM。 3） 按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加量。【注意：如果裂解不充分可以适当添加用量，如果需要高浓度的蛋白样品，可适当降低用量。】 5） 用玻璃匀浆器匀浆直至充分裂解，此过程尽量控制在1-2分钟内，以减少蛋白的降解。如果提取的蛋白样品用于ChIP，应置于冰上或4℃继续裂解10~ 20min。 4） 充分裂解后，10,000-14,000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、WB和ChIP等实验。 5） 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过高强度的漩涡混匀器使样品裂解充分，之后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解的足够充分。
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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