DPPP (Diphenyl-1-pyrenylphosphine)二苯基-1-芘基膦

（膜特异性的脂质过氧化探针）

产品关键词：

DPPP 二苯基-1-芘基膦；lipid peroxidation 脂质过氧化；lipid hydroperoxides 脂质氢过氧化物；MeLOOH；Methyl Linoleate亚油酸甲酯；CAS NO：110231-30-6；

产品信息

产品描述

二苯基-1-芘基膦（Diphenyl-1-pyrenylphosphine,DPPP）是一种荧光探针，主要用来检测脂质过氧化。DPPP自身基本无荧光，一旦以化学计量的方式与脂质氢过氧化物反应生成强荧光分子-二苯基-1-芘基膦氧化物（DPPP-O）（最大激发波长~351nm，最大发射波长~380nm）(见图1)。DPPP的疏水特性使其轻易插入细胞膜和脂质体，是一款优秀的工具用来研究膜特异性的脂质过氧化。DPPP还能用作一种荧光探针，监测低密度脂蛋白（LDL）和细胞氧化水平。

图1.反应机理（来自文献）：Okimotoa Y, Watanabea A, Nikia E, Yamashitab T, Noguchia N. A novel fluorescent probe diphenyl-1-pyrenylphosphine to follow lipid peroxidation in cell membranes. FEBS Lett. 2000 Jun 2;474(2-3):137-40. doi: 10.1016/s0014-5793(00)01587-8. PMID: 10838073.

产品特性

1） CAS NO：110231-30-6

2） 同义名：DPPP; 1-(Diphenylphosphino)pyrene;二苯基(芘-1-基)膦；

3） 分子式：C28H19P

4） 分子量：386.42

5） 外观：固体

6） 纯度：≥95%

7） 溶解性：溶于DMF（~10mg/ml）、二氯甲烷（~1mg/ml）、不溶于水

8） 化学结构式： 

保存与运输方法

保存：2-8℃避光干燥保存，至少1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用步骤（仅做参考）

1. 细胞铺板，培养过夜；

2. DPPP探针的加载：j 低温保存的DPPP粉末置于室温平衡至少30min，往瓶内加入无水DMF，配制成25mM的储存液；k 用细胞培养基或生理缓冲液比如：HHBS，稀释储存液到所需的工作浓度，比如：25µM；最佳的工作浓度需设置梯度摸索；l吸走细胞培养基，用PBS清洗一次；加入新鲜配制的DPPP染色工作液；

3. 37℃避光孵育30min。

4. PBS清洗1~2次，去除多余染料；

5. 【可选】脂质过氧化的诱导：用待研究化合物处理细胞或使用阳性对照（比如：AAPH）来诱导脂质过氧化。

6. 荧光测定：用荧光酶标仪、荧光光度计测定荧光值；或用带合适滤片组（Ex：~351nm，Em：380nm）的荧光显微镜做成像分析。

染色示例（来自文献）

Ref 1）Okimotoa Y, Watanabea A, Nikia E, Yamashitab T, Noguchia N. A novel fluorescent probe diphenyl-1-pyrenylphosphine to follow lipid peroxidation in cell membranes. FEBS Lett. 2000 Jun 2;474(2-3):137-40. doi: 10.1016/s0014-5793(00)01587-8. PMID: 10838073.

实验目的：显微观察DPPP-O的生成。

实验方法：PMNs（1×106 cells/ml）悬浮于含1% FBS的HBSS溶液中贴壁培养。DPPP溶于DMSO配制成5mM的储存液，之后加入细胞中使其工作浓度为5uM。避光孵育15min后，用含1% FBS的HBSS清洗去除多余染料。待测样本置于显微镜上，然后加入溶于甲醇的MeLOOH（5uM）。同一视野下监测30min。

Fig. . Visualization of lipid peroxidation in PMNs. PMNs (1×106 cells/ml) were stained with 5 μM DPPP for 15 min and then washed with HBSS containing 1% FBS. Increasing fluorescence after addition of 5 μM MeLOOH (A: 0 min and B: 30 min) and without H2O2 (C: 30 min). Higher magnification (inset, B).

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参考文献

[1] Okimotoa Y, Watanabea A, Nikia E, Yamashitab T, Noguchia N. A novel fluorescent probe diphenyl-1-pyrenylphosphine to follow lipid peroxidation in cell membranes. FEBS Lett. 2000 Jun 2;474(2-3):137-40. doi: 10.1016/s0014-5793(00)01587-8. PMID: 10838073.

[2] Takahashi M, Shibata M, Niki E. Estimation of lipid peroxidation of live cells using a fluorescent probe, diphenyl-1-pyrenylphosphine. Free Radic Biol Med. 2001 Jul 15;31(2):164-74. doi: 10.1016/s0891-5849(01)00575-5. PMID: 11440828.

[3] Okimoto, Y., Warabi, E., Wada, Y., et al. A novel method of following oxidation of low-density lipoprotein using a sensitive fluorescent probe, diphenyl-1-pyrenylphosphine. Free Radic. Biol. Med. 35(6), 576-585 (2003).

  — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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