Rhodamine-PNA (Rhodamine labeled Peanut Agglutinin) 

罗丹明标记花生凝集素

产品信息

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5）  更多凝集素产品逐渐开发中。。。。。。

产品描述

花生凝集素（Peanut Agglutinin，PNA）约占常见花生中重量的0.15%，是一种糖类识别蛋白，由4个相同亚基（不含糖类）构成的蛋白，分子量为110kDa。优先结合T抗原（Galβ1, 3GalNAc），这一结构存在于大量糖复合物上，比如M血型和N血型，神经节苷酯，以及许多其他可溶的和膜结合的糖蛋白和糖脂。除掉某些例外，PNA的受体序列通常是唾液酸化的，防止凝集素结合到寡糖上。唾液酸即使不会直接结合受体糖，但可能抑制结合。稀释液内的钙离子能提高PNA结合到受体上，可能通过中和受体序列邻近的唾液酸残基上的负电荷来发挥作用。

花生凝集素（Peanut Agglutinin，PNA）适用于鉴别正常和肿瘤组织，以及评估移行粘膜上肿瘤的恶性程度。另外，PNA结合能用于测定淋巴组织上的细胞成熟度，用来区分男人和实验室动物上各种淋巴细胞亚群，以及用来测定大量疾病下的淋巴细胞群水平。PNA还应用于小鼠干细胞的分选，用于穿透组织相容性屏障的骨髓移植。

本品是罗丹明标记的花生凝集素（Peanut Agglutinin,Rhodamine-PNA），Ex/Em= 550/575nm，亲和纯化所得，基本不含未标记的荧光素。建议工作浓度范围是5-20μg/ml。

产品特性

1）  同义名：Peanut Agglutinin, Rhodamine Conjugate; Rhodamine labeled PNA Lectin; Rhodamine labeled Peanut Lectin;花生凝集素，罗丹明标记；

2）  糖类特异性：半乳糖（Galactose）

3）  外观：溶液（溶于10 mM HEPES, 0.15 M NaCl, pH 7.5, containing 0.1 mM Ca2+, 0.08% sodium azide）

4）  蛋白浓度：5mg/ml

5）  Ex/Em：550/575nm

6）  抑制和/或洗脱糖类：200mM半乳糖

7）  应用：IF、糖生物学

保存与运输方法

保存：2-8℃避光保存，至少1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）  本品置于2-8℃长期保存可能会产生沉淀，使用前请37℃温育数分钟，之后离心吸取上清使用。此操作基本不会对产生性能造成负影响。

2）  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

1）文献来源：Wu L, Sampson NS. Fucose, mannose, and β-N-acetylglucosamine glycopolymers initiate the mouse sperm acrosome reaction through convergent signaling pathways.ACS Chem Biol. 2014;9(2):468-475. doi:10.1021/cb400550j

实验对象：Mouse Sperm小 鼠精子

实验目的：精子顶体反应（Sperm Acrosome Reaction）

实验方法：罗丹明标记的花生凝集素（Rhodamine-labeled PNA at a concentration of 20ug/ml DDI）滴加到固定于盖玻片上的精子，室温孵育10min。用2ml DDI水（2次，每次10min）清洗后，盖玻片封固在Superfrost plus载玻片上，载玻片上滴有一滴（6ul）抗荧光淬灭剂，四周用指甲油封固，荧光倒置显微镜下观察。精子呈现连续性的红色荧光连同顶体弧记为完整顶体；没有红色或不连续荧光记为顶体反应。每组计数200个精子。

2）文献来源：Rajabi-Toustani R, Akter QS, Almadaly EA, et al. Methodological improvement of fluorescein isothiocyanate peanut agglutinin (FITC-PNA) acrosomal integrity staining for frozen-thawed Japanese Black bull spermatozoa. J Vet Med Sci. 2019;81(5):694-702. doi:10.1292/jvms.18-0560

实验对象：小鼠视网膜（Retinas）

实验目的：花生凝集素（Peanut agglutinin, PNA）是视锥细胞的标记物，能用来促进视网膜的定向发育。固定组织的花生凝集素染色。

实验方法：视网膜经解剖后转移到硝酸纤维素膜内层，用PBS快速清洗后，-80℃冷冻保存。接下来，用樱花切片机制7um切片，之后于10%福尔马林室温固定20min。这些切片用PBS清洗，用含0.1%吐温20的PBS室温处理30min。之后，切片用含50ug/ml罗丹明-PNA和1ug/ml Hoechst 33342的PBS-Tween室温孵育1h，清洗后，封片，于荧光显微镜下观察。

Fig. Confocal microscopy in conjunction with peanut agglutinin (PNA) staining allows differentiation between rods and cones in live explants. A: A schematic representation of the retina and its layers (ganglion cell layer [GCL], inner plexiform layer [IPL], inner nuclear layer [INL], outer plexiform layer [OPL], outer nuclear layer [ONL], inner and outer segments [IOS]) to illustrate the difference between a transverse section and a confocal slice. The image is a transverse section stained with rhodamine-PNA and Hoechst to allow comparison with the confocal images of B. The scale bar represents 25μm. B: Hoechst/PNA staining of the ONL on a whole-mount retinal explant by confocal microscopy. Explants were cultured photoreceptor side facing down. Retinal whole mounts were stained with Hoechst/PNA for 1 h at 37°C before live imaging by an inverted confocal microscope. PNA, the cone-specific marker, was used to bring the photoreceptor layer into focus. Slices preceding the PNA-stained layers are the Hoechst-positive nuclei in the ONL. These data are typical of at least three different experiments. Confocal slices collected were 1.6μm thick. The scale bar represents 10μm.

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