时间:2016-05-11
作者:懋康生物
★ 服务描述
细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。细胞增殖的研究方法有很多,其中测定细胞生长曲线是检测细胞绝对生长数的常用方法,也是判定细胞活力的重要指标。我公司通过CCK-8和克隆形成实验来测定细胞的生长和增殖能力。
★ 服务内容
1:CCK-8检测细胞毒性实验;
CCK-8检测细胞毒性的原理是:CCK8在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。细胞毒性越小,则颜色越深;因此,对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
2:克隆形成实验;
克隆形成实验是测定细胞增殖能力的有效方法之一。其原理是:单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所形成的细胞群体称为克隆。每个克隆约含有50个以上的细胞。通过计数克隆形成率,可以反映细胞的增殖能力和独立生存能力。常用的方法有:平板克隆形成实验和软琼脂培养克隆形成实验。
①:平板克隆形成实验
该方法操作简单,适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。实验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。 细胞一定要分散成单个细胞,不能有细胞团。同时,接种密度不能过大。
②:软琼脂培养克隆形成实验
软琼脂培养法常用于检测肿瘤细胞和转化细胞系。实验中琼脂与细胞相混时,要注意控制琼脂的温度不宜超过40℃。细胞的密度每平方厘米不超过35个,一般6cm的平皿接种1000个细胞。正常细胞在悬浮状态下不能增殖,不适用于软琼脂克隆形成试验。
★ 客户所得
1:克隆形成实验的原始图片及分析结果;
2:完整的实验报告(包括实验材料,实验步骤,实验结果等);