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荧光定量PCR检测服务
时间:2016-05-11     作者:懋康生物    
★  服务描述

荧光定量PCR技术(Fluorescence Quantitative Real Time PCR,RT-PCR)是在常规PCR技术的基础上引入了一种荧光化学物质。该荧光物质能够随着PCR反应产物的不断累加,产生成比例的荧光信号强度。这样就可以通过监测荧光强度的变化来对PCR反应进行实时的监测。目前,实时荧光定量PCR技术已经广泛的应用于生物基础科学研究、医学临床诊断、疾病研究及药物研发等领域。本公司可根据您的科研需求,为您提供SYBR Green染料法或TaqMan探针法实时荧光定量PCR检测服务。通过对DNA或RNA的荧光定量PCR监测, 实现对基因的相对定量、绝对定量和定性分析。


★  服务内容
1:mRNA 的定量分析:


荧光定量PCR可以利用内参基因对实验基因的表达进行相对定量分析,也可以通过外用标准品对实验基因进行绝对定量分析。
2:miRNA 的定量与定性分析:
MicroRNA(miRNA)成熟体是由21—23个碱基构成的含有发夹结构的单链小分子RNA,长度太短不能通过普通的实时定量PCR进行检测。因此,我们通过加尾法(在miRNA的3’段加一个polyA尾巴)及颈环法(设计特殊的含有茎环结构的反转录引物,配合实时定量PCR引物及探针)可以精确检测微量样品中microRNA表达水平。

3:lncRNA的定量与定性分析:

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)与mRNA相比是不编码蛋白的,但又比miRNA要长(大于200nt),研究证明ncRNA 能在表观遗传、转录及转录后水平上调控基因表达,与人类疾病的发生、发展和防治有着密切的联系。我公司可设计特异性引物对lncRNA进行定量分析。
4:定性分析

荧光定量PCR还可以用来检测单核苷酸多态性(SNP)、点突变、等位基因以及DNA甲基化等。能够简单快速地对目的基因进行高特异性、高灵敏度的检测,同时闭管操作的实时检测可以有效防止反应产物的污染。

主要过程为:RNA抽提与定量;引物设计及荧光定量PCR;数据分析;实验报告提交。(画图说明)


★  服务说明
1:在服务开始前,请先咨询我们公司。我们会针对您的实验目的设计个性化的最优实验方案。
2:客户提供的实验材料必须在正确的条件下保存和运输(上海本地客户我们可以上门提取)。我们不推荐直接提供RNA或cDNA样品,除非能证明提供的样品质量可以用于荧光定量PCR。
3:客户需提供尽可能详细的实验背景信息(包括物种信息,目的基因信息等)。


4:客户可以自己提供荧光定量PCR引物,也可以由我们设计并合成,但需收取相应费用。
5:为了确保实验数据的可靠性,每个样品我们都采用三复孔,且保证熔解曲线的单一性。



★  服务周期
实验周期视具体的样品数量及需测定的数据数目而定。


★  客户所得
1:荧光定量PCR的原始数据及分析结果;
2:完整的实验报告(包括实验材料,步骤,结果分析等);


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