★ 服务描述
一般情况下，RNA干扰实验是通过化学合成小片段siRNA，或者构建shRNA表达质粒，通过转染试剂介导进入细胞实现RNA干扰。但是这两种方式对于难转染的细胞（例如原代细胞，干细胞，悬浮细胞等）往往因为转染效率低而导致RNA干扰实验失败。而通过构建慢病毒shRNA干扰质粒并包装病毒，再用病毒侵染靶细胞能很好的解决这一难题。
★ 服务内容
1：shRNA干扰靶点序列的设计；
2：shRNA 慢病毒质粒的构建；
3：shRNA慢病毒包装与病毒滴度测定；
★ 服务说明
1：我们的RNA干扰服务针对所有的哺乳动物细胞，暂不提供植物和原核生物的RNA干扰服务；
2：RNA干扰的对象可以是编码蛋白的mRNA序列，也可以是长的非编码RNA(lncRNA)序列；
3：针对不同的靶基因，我们一般设计3-4条干扰序列，保证至少有一条序列干扰效果大于70%（RNA水平）。也可由客户提供干扰靶点，但我们不保证干扰效果；
4：我们提供多个慢病毒干扰载体供客户选择（见下方载体信息）；
5：我公司包装的shRNA干扰慢病毒颗粒滴度可以达到1×1010TU/ml，完全能够满足动物实验；
★ 客户所得
1：构建好的shRNA质粒及对照质粒；
2：合同规定量的慢病毒颗粒及等量的对照病毒颗粒；
3：完整的实验报告（包括实验材料，实验步骤，实验结果等）；
★ 服务周期
从靶点设计到病毒包装完成总共需要25个工作日；
★ 载体信息
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载体编号 |
筛选标记 |
载体骨架主要元件 |
|
|
荧光 |
真核抗性 |
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pHY-LV-KD1.1 |
GFP |
无 |
U6-shRNA-CMV-GFP |
|
pHY-LV-KD1.2 |
RFP |
无 |
U6-shRNA-CMV-RFP |
|
pHY-LV-KD1.4 |
无 |
Puromycin |
U6-shRNA-CMV-Puromycin |
|
pHY-LV-KD2.1 |
GFP |
无 |
U6-shRNA-EF1α-GFP |
|
pHY-LV-KD3.1 |
GFP |
无 |
U6-shRNA-UBC-GFP |
|
pHY-LV-KD5.1 |
GFP |
Puromycin |
U6-shRNA-CMV-GFP-PGK- Puromycin |
|
pHY-LV-KD5.2 |
RFP |
Puromycin |
U6-shRNA-CMV-RFP-PGK- Puromycin |
|
pHY-LV-KD5.4 |
GFP |
Puromycin |
U6-shRNA-UBC-GFP-PGK- Puromycin |
