ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging

内质网蓝色荧光探针（活细胞成像用）

点击丨商城购买 积分领好礼

产品标签

ER-Tracker Blue-White DPX 内质网蓝色荧光探针；ER-Tracker Red; ER-Tracker Green; DiOC6(3)；CAS:53213-82-4；

产品信息

【温馨提示1】：见我司懋康生物整理得溶酶体荧光探针（Lysotracker and Lysosensor）产品专题。

【温馨提示2】：见我司懋康生物整理得线粒体荧光探针（Mitotracker）产品专题。

产品描述

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料，高度选择性结合内质网（ER）。不同于传统的内质网染料DiOC6(3)，该系列染料极少染色线粒体，且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后，可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Blue-White DPX是Dapoxyl (DPX)染料家族的成员之一，这类染料具有长发射波长，高吸光系数，高量子产量和宽广的斯托克频移特征。这类染料属于环境敏感型的探针，随着溶剂极性的增加，最大荧光迁移到更长的波长，伴随着光量子产量降低。

本品为DMSO储存液，浓度为1mM。用于活细胞内质网染色，建议工作浓度为100nM-1µM，需根据实际情况做优化调整。

产品特性

1）   分子式：C26H21F5N4O4S

2）   分子量：580.5283

3）   外观：黄色液体

4）   Ex/Em：374/430-640nm (in methanol)

5）   检测滤片：DAPI or UV longpass

6）   化学结构式：

保存与运输方法

保存：≤-20ºC避光干燥保存，收到货至少6个月有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   整个染色过程中需注意避光。

2）   由于ER-Tracker Blue-White DPX是环境敏感型探针，会产生波动较大的发射吸收峰，在430-640nm之间出现。长通DAPI滤光片观察效果最理想。 

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞（BPAE）优化所得，且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考，请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

1.      试剂准备

ER-Tracker Blue-White DPX以1mM的DMSO储存液形式提供，使用前请将ER-Tracker Blue-White DPX 从冰箱内取出，确保回温至室温后，经短暂离心将所有溶液沉到管底。

2.      细胞染色

2.1    制备染色工作液：将1mM ER-Tracker Blue-White DPX稀释至工作浓度，建议工作浓度100nM-1µM。为了最小化染料过高引起的假象，建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。【注意】：在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡盐溶液（HBSS/Ca/Mg, Cat# MS3501-500ML）内进行染色可得到最佳结果。

2.2    细胞染色：对于贴壁细胞，吸除培养基，用HBSS清洗细胞，加入预热的染料工作液，37℃孵育15-30min。吸除染色液，加入不含探针的新鲜培养基，并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定，请跳转到步骤3。

3.      细胞固定及透化

3.1    固定和透化细胞：用4%甲醛于37℃固定细胞10-20min。ER-Tracker Blue-White DPX染色信号在甲醛固定后仅能部分保留下来。如果还需要做其他染色，细胞需用0.2% TritonX-100 透化处理10min。

3.2    清洗和观察细胞：细胞固定后，用合适缓冲液清洗2次，每次5min。之后荧光显微镜下观察。

染色示例

Fig 1. Live bovine pulmonary artery endothelial cells stained with ER-Tracker Blue-White DPX and MitoTracker Red CM-H2XRos. Live bovine pulmonary artery endothelial cells stained with ER-Tracker™ Blue-White DPX and MitoTracker® Red CM-H2XRos. The endoplasmic reticulum appears green and the mitochondria appear orange. The image was acquired using a fluorescence microscope equipped with a triple-bandpass filter set appropriate for DAPI, fluorescein and Texas Red®dyes.

相关产品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。