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Rapid Collagenase Assay Kit with Type II Collagen Substrate
目录号 3002 售价 7472.00元
规格 100 assays 运输温度
其他名称 Rapid Collagenase Assay Kit with Type II Collagen Substrate 保存温度
CAS号 N/A 有效期 1年
应用 胶原酶活性检测 订购数量
产品简介:

Chondrex 快速胶原酶活性检测试剂盒(Collagenase Assay Kits)

 

背景描述:

胶原酶(Collagenases),基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)家族的成员之一,属于内肽酶类,在三螺旋区降解天然胶原,参与结蹄组织的生理和病理周转过程。胶原是动物基质结蹄组织的主要纤维成分。胶原酶可能在肿瘤细胞转移的多个阶段中,对肿瘤细胞侵袭穿透细胞外基质的过程起到促进作用。胶原酶已被支持用于临床治疗杜普征氏掌挛缩(Dupuytren's contracture),佩罗尼氏病(Peyronie's disease)和伤口愈合。

 

胶原酶活性检测方法很多,传统的方法包括胶原酶谱法(Collagen Zymography),该法首先将样本加入含胶原的SDS-PAGE凝胶中电泳,然后在适当缓冲液中复性12-16h,最后染色。当底物被酶降解,在整个黑色的背景中能看到清晰透明的降解条带,从而来判断是否存在胶原酶活性。该方法不仅费力费时,且很可能因复性不完全逆转,导致酶活性降低,结果出现较大偏差。

 

Rapid Collagenase Assay Kit (I) and (II)(Chondrex, Inc)

1. 试剂盒优势

含有测定胶原酶活性的所有必要成分包括重组人MMP-8(用作对照)和两种类型的胶原酶活化剂。

不同于抗体为基础的ELISA试剂盒仅能检测酶蛋白的存在,这些试剂盒目的在于测定酶活性。

试剂盒使用FITC标记的可溶性牛I型胶原或II型胶原为底物,只需2h就能完成测试。

比底物凝胶分析法(酶谱法)快10倍,检测灵敏度比放射同位素标记胶原法更灵敏。


2. 特异性

哺乳动物胶原酶


3. 工作原理

哺乳动物胶原酶切割胶原分子上的所有三个α链,产生3/4和1/4大小的胶原片段,TCA和TCB,这两个片段的变性温度分别为34-35℃和28-29℃,而所有完整胶原(天然胶原)的变性温度是40℃。因此,35℃下这些切割片段能选择性变性为随机的螺旋构象,能够被一种有机溶剂提取出来。为了缩短变性过程(通常需60min),一种蛋白酶被引入用来进一步消化胶原酶降解后的产物。


4. 反应步骤

Collagenase Assay Kit.jpg


5. 试剂盒组分

组分名称

数量

规格

保存

Reference-recombinant Human MMP-8

1 vial

25µl, 100 units/ml

-80℃

Solution A-FITC-Collagen Dilution buffer

1 bottle

10ml

4℃

Solution B-Sample dilution and reaction buffer  

1 bottle      

50ml

4℃

FITC-collagen

1 bottle

10ml, 1mg/ml in 0.01M acetic acid  

-20℃        

Activator 1-20X APMA

1 vial

1ml

RT

Activator 2-Trypsin

1 vial

1mg lyophilized

-20℃

Proteinase Inhibitor

1 vial

3mg lyophilized

-20℃

Enhancer-Elastase

1 vial

1mg lyophilized

-20℃

Stop solution-o-phenanthroline

1 vial

1ml 10mM in ethanol

RT

Extraction buffer

2 bottles

25ml

RT

ELISA plate black

2 each

96 well

RT


  1. 6. 试剂盒订购:Chondrex原装正品,欢迎来电咨询,021-54736159,QQ:2971634497。

货号        

名称

规格

目录价(元)  

3014

Bacterial Collagenase Assay Kit

100 assays      

5888

3001

Rapid Collagenase Assay Kit with Type I Collagen Substrate         

100 assays

6944

3002

Rapid Collagenase Assay Kit with Type II Collagen Substrate

100 assays

7472

3003

MMP-13 Inhibitor Assay Kit

100 assays

8160

3001 3002 Rapid Collagenase Assay Kit with Type I Collagen Substrate User Manual

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

 

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