5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸

产品标签

5-Fluoroorotic Acid (5-FOA)，Counter-selection agent 负选择（反选择），Yeast two-hybrid system 酵母双杂交系统，YNB 酵母氮源基础，CAS：703-95-7

产品信息

【温馨提示】：见我司整理的酵母双杂交（Yeast two-hybrid assay）检测产品专题。

产品描述

5-氟乳清酸（5-Fluoroorotic Acid，5-FOA）用于酵母负选择是一种常用的分子遗传筛选方法。酵母菌质粒清除、质粒穿梭、等位置换和双杂交筛选都会用到5-FOA。5-FOA自身对酵母细胞无毒，但功能型URA3基因能编码表达乳清酸核苷-5′-单磷酸脱羧酶（OMP脱羧酶），将其转化为有毒形式（如5-氟尿嘧啶），从而使得酵母细胞无法生长。因此，在添加尿嘧啶的5-FOA培养基中，携带URA3突变基因的酵母菌能正常生长。5-FOA主要用于酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae（URA3）的鉴定和筛选，虽然曾用于其他菌株，包括粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombe（URA4 and URA5），白色念珠菌Candida albicans（URA3）和大肠杆菌E. coli（pyrF）。酵母双杂交系统中5-FOA的使用允许构建激活结构域杂交文库来鉴定蛋白-蛋白相互作用。

产品特性

1）CAS NO：703-95-7

2）同义名：5-fluoro-2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid; 5-Fluorouracil-4-carboxylic acid; 5-Fluoro orotic acid; 2,6-Dihydroxy-5-fluoropyrimidine-4-carboxylic acid;

3）分子式：C5H3FN2O4

4）分子量：174.10 g/mol

5）纯度：>99%

6）外观：类白色至淡黄色粉末

7）熔点：~258°C（高温非常稳定，如煮沸和高压灭菌）

8）溶解性：溶于DMSO，微溶于水，乙醇，甲醇

9）化学结构：

保存与运输方法

保存：-20℃干燥保存，2年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

一、5-FOA培养基配置方法（以粉末形式）

1.1 配制400ml标准的酵母合成培养基，并加入1g 5-FOA（#MF2521）粉末，充分溶解混匀，0.22µm滤膜过滤除菌。【或者可当高压灭菌的标准培养基冷却到55ºC后再加入1g 5-FOA粉末，然后过滤除菌。】

1.2 高压灭菌琼脂粉/水混合液（浓度为20g/600ml），使其冷却到55ºC。

1.3 将温热的5-FOA培养液倒入琼脂粉/水溶液内，搅匀后，倒平板。

二、5-FOA培养基配置方法（以储存液形式）

2.1 取100mg 5-FOA冻干粉，用1ml无水DMSO充分溶解，配制成100mg/ml（100×）的储存液。短期频繁使用，置于4ºC避光保存；长期保存，根据单次用量分装冻存，-20ºC保存6个月有效。

2.2 根据实验室认可的方法，配制标准的酵母合成培养基（含琼脂粉），高压灭菌。放入转子一起灭菌以便后续搅匀组分用。

2.3 冷却到55ºC后加入任何热敏感组分（氨基酸，糖类或者其他成分）。

2.4 每升培养基加10ml100× 5-FOA储存液，混匀后，倒平板。

注意事项

1）5-FOA微溶于水，粉末溶解过程中可加热（如55-65ºC）助溶30min~1h直至完全溶解。5-FOA极易溶于DMSO，但高浓度DMSO对细胞有毒，需注意控制DMSO的终浓度。

2）5-FOA培养基不用调节pH。

3）5-FOA培养基平板置于4ºC避光保存，可存放3个月，建议用封口膜封口四周

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。