目录号 | MM0719-100ML | 售价 | 220.00元 | |||||||||||||||||||||||||||||
规格 | 100ml | 运输温度 | 冰袋 | |||||||||||||||||||||||||||||
其他名称 | TMB One Solution HRP Color Development for Blotting | 保存温度 | 2-8℃避光保存 | |||||||||||||||||||||||||||||
CAS号 | N/A | 有效期 | 2年 | |||||||||||||||||||||||||||||
应用 | 膜印迹检测 | 订购数量 |
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产品简介: TMB One Solution (HRP-based Blotting) 单组分TMB显色液(膜印迹,HRP显色用)
产品标签 TMB One Solution 单组份TMB溶液;ELISA;HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶;DAB;CAS NO:64285-73-0;
产品信息
产品描述 酶联免疫分析技术(ELISA)广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析,辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是ELISA技术常用的一种酶,能催化底物如3,3'5,5'-四甲基联苯胺(TMB)发生显色反应,从而进行定量或定性分析。由于TMB比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用,TMB主要用于ELISA,免疫斑点杂交或免疫组化等实验,也有报道将其用于氯的检测分析。
通常TMB显色试剂由多个组分构成,必须在使用前进行配制,并且容易产生沉淀,使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术,将所有相关试剂全部配在一个溶液,即仅由单一溶液组成,不仅简化了操作步骤,而且使检测结果更加稳定可靠。
本品专门为免疫印迹实验而设计,其在反应位点处产生紫色不可溶物,背景很少或几乎无背景,用水可终止显色反应。适合用于膜印迹免疫实验,包括WB,斑点杂交,Southern Blot和Northern Blot等HRP的膜显色检测。
保存与运输方法 保存:2-8℃避光保存,2年有效。 运输:冰袋运输。
注意事项 1) 本品含TMB和H2O2,对人体有刺激性,请注意防护。 2) 如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色,请停止使用。 3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法(膜的HRP显色检测) 1) 使用之前,取出适量单组份TMB显色液,使其回到室温再开始使用; 2) 参考相应实验步骤,在与HRP标记的抗体孵育一段时间后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5min。 3) 洗涤完毕后,去除洗涤液,滴加适量单组份TMB显色液充分覆盖膜。 4) 室温避光孵育5-30min或更长时间(可长达数小时),直至显色到预期深浅。【注意】:建议根据实验需求选择显色时间。 5) 直接拍照记录。 常用问题 1. 背景显色太深 1)如果背景(没有样品的对照)显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面,使用经过适当吸附的二抗,以减小二抗的非特异性吸附。 2)可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所帮助。
2. 没有显色或显色太弱 1)适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果,滴一滴稀释二抗在离心管内,检测二抗是否被正常显色。 2)可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如生物素检测体系。 3)可以适当延长显色时间。 4)如果上述改进不能获得预期效果,对于WB,可以考虑更换效果更好的一抗;对于Southern、Northern Blot等可考虑更换探针。
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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