目录号 | MF2291-5000UL | 售价 | 1799.00元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
规格 | 50×100μl | 运输温度 | 干冰运输 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
其他名称 | 保存温度 | -80℃保存,六个月有效。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CAS号 | N/A | 有效期 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
应用 | 订购数量 |
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
产品简介: SHuffle T7 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞
产品标签 GT115化学感受态细胞;TOP10;DH10B;XL1-Blue;pCpG-free质粒;pCpG-mcs;pCpG-LacZ; 产品订购: 更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。网站:www.maokangbio.com。
菌株描述 SHuffle T7菌株是一款基因工程改造的K12衍生菌株,特别设计改进含二硫键蛋白在细胞质内的表达,适合于T7启动子驱动的蛋白表达。
该菌株染色体中整合一个拷贝的二硫键异构酶基因—DsbC,促进错误氧化的蛋白转化为正确形式。另外,细胞质中的DsbC也是一个分子伴侣,能协助不含二硫键蛋白的正确折叠。SHuffle T7菌株染色体中整合一个拷贝的T7 RNAP基因,可以表达噬菌体T7 TNA聚合酶,从而适用于T7启动子诱导的蛋白表达。LacIq基因的严格控制表达允许毒性基因得以克隆。SHuffle T7菌株具抵抗噬菌体T1(fhuA2)感染的特点,具链霉素和壮观霉素抗性。 SHuffle T7菌株基因型:F´ lac, pro, lacIq / Δ(ara-leu)7697 araD139 fhuA2 lacZ::T7 gene1 Δ(phoA)PvuII phoR ahpC* galE (or U) galK λatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, lacIq) ΔtrxB rpsL150(StrR) Δgor Δ(malF)3
产品描述 本品是大肠杆菌SHuffle T7菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。经pUC19载体检测转化效率可达>1×108cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
产品包装
保存与运输条件: 保存:-80℃保存,六个月有效。 运输:干冰运输。
注意事项 1) 感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存,不可反复冻融且放置时间过长,否则会减低感受态细胞的转化效率。 2) 最好在冰上融化感受态细胞。 3) 进行转化操作时,需在相应温度及无菌条件下进行。 4) 为防止转化实验不成功,可保留部分连接反应液以重新转化,将损失降到最低。 5) 产品包装内含载体pUC19 DNA(10pg/μl),供对照实验用。 6) SHuffle T7菌株具链霉素、壮观霉素抗性,不可用于具链霉素、壮观霉素抗性质粒的转化。 7) 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间、温度、IPTG浓度(0.1~2mM)都需进行优化。 8) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】 1) 从-80℃冰箱取出取感受态细胞,迅速置于冰浴中,5min后待菌块融化,加入目的质粒,用手轻弹管底轻轻混匀(避免用枪吹打),冰浴静置25min。 2) 42℃水浴热激45s,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。 3) 向每个离心管中加入700 μl无菌的LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200 rpm振荡培养60min,目的使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。 4) 低速离心收菌(比如5000rpm,1min),留取50-100μl左右上清,用枪轻轻吹打重悬菌块,之后加到含相应抗生素的LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于室温(或37℃)直至液体被吸收,之后倒置放于37℃过夜培养。
【注意】: a)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可不用离心,直接取少量转化产物涂布平板;反之,若转化的DNA总量较少,则通过离心(5,000 rpm,1min)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。 b)新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。 c)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
相关产品
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本,以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。 |