| 目录号 | MF2298-5000UL | 售价 | 1799.00元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 规格 | 50×100μl | 运输温度 | 干冰运输 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 其他名称 | 保存温度 | -80℃保存，六个月有效。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| CAS号 | N/A | 有效期 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 应用 | 订购数量 |
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产品简介: GT115 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞
产品标签 GT115化学感受态细胞；TOP10；DH10B；XL1-Blue；pCpG-free质粒；pCpG-mcs；pCpG-LacZ；
产品订购： 更大包装或产品技术问题，请来电/在线咨询，电话：021-54736159 。网站：www.maokangbio.com。
菌株描述 GT115菌株是一款特别开发用于含R6Kγ复制原点和携带发夹结构等二级结构的质粒DNA进行克隆和扩增的大肠杆菌菌株。GT115含pir基因，可以编码利用R6Kγ为复制子的载体所必需的π蛋白。发夹结构在大肠杆菌内是很不稳定的，因为菌体内存在的SbcCD蛋白复合体会识别并切除发夹结构。通过基因突变删除大肠杆菌内的sbcC和sbcD基因，能显著改善含发夹结构质粒重组克隆的稳定性和拷贝数。rpsL(StrA)基因赋予菌株链霉素抗性。
GT115菌株基因型： F- mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ∆M15 ∆lacX74 nupG recA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galE15 galK16 rpsL(StrA) endA1 ∆dcm uidA(∆MluI)::pir-116 ∆sbcC-sbcD
产品描述 本品是大肠杆菌GT115菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热激转化。经pUC19质粒（AmpR）检测转化效率>2×107 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
产品包装
保存与运输条件： 保存：-80℃保存，六个月有效。 运输：干冰运输。
注意事项 1） 感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。 2） 最好在冰上融化感受态细胞。 3） 进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。 4） 为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到最低。 5） 产品包装内含载体pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。 6） GT115菌株具链霉素抗性，请不要使用含此抗性的质粒。 7） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】 1） 从-80℃冰箱取出感受态细胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物），用手轻弹管底轻轻混匀（避免用枪吸打），冰浴静置25min。 2） 42℃热击45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min。此过程不要摇动离心管。 3） 向每个离心管中加入900 μl无菌的S.O.C.或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，225 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。 4） 5000rpm离心1min收菌，留取100μl上清轻轻吹打重悬菌体，加到含相应抗生素的S.O.C.或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养过夜。
【注意】： a）涂布用量可根据具体实验调整。若预计的克隆较多，可直接吸取转化产物涂布平板；若预计的克隆较少，则同上离心（5,000 rpm，1min）后留取适量培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。 b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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